Хитозан – природный аминополисахарид, в составе которого чередуются остатки глюкозамина и N-ацетилглюкозамина. Особенности структуры этого полимера обуславливают ряд привлекательных свойств – биодеградируемость, биосовместимость, иммуномодулирующие свойства [1]. Поликатионная природа хитозанового полимера обуславливает его антибактериальные свойства как в отношении грам-положительных так и грам-отрицательных бактерий, а также грибов [2]. Предполагается, что положительно заряженный хитозан взаимодействует с поверхностными структурами клеток, нарушает их нормальное функционирование, и, связываясь с цитоплазматической мембраной, нарушает её целостность [3]. Это позволяет использовать хитозан в медицинских целях в качестве составного компонента присыпок, гелей и мазевых форм при местном лечении инфицированных участков кожи. Возможно использование хитозана и для лечения дисбактериозов кишечника.
Читать далее…
Для эффективной ассимиляции источников азота бактерии выработали различные системы регуляции, которые отвечают на изменение доступности азотсодержащих соединений и контролируют экспрессию определенных групп генов. Одним из ключевых белков-регуляторов азотного метаболизма в клетках бацилл является фактор транскрипции ТпгА. Он активен в условиях лимитации азотом, и в активном состоянии находится в комплексе с мембраносвязанным белком NrgB, относящимся к регуляторным белкам типа РП. Белки NrgB и NrgA в клетках В. subtilisформируют аппарат транспорта аммония в клетки.
Читать далее…
Рис является одной из основных зерновых культур для большей части населения земного шара. В семенах риса много крахмала от 60 до 70% и относительно небольшое количество белка от 5 до 11%. Следовательно, одним из основных показателей пищевого качества риса является количественное соотношение в нем белка и крахмала. Использование продуктов переработки риса для пищевых целей требует, прежде всего знание биохимических показателей пищевой ценности риса. В связи с этим мы предприняли попытку определить количественное содержание белка, крахмала и его составных частей – амилозы и амилопектина и оценить активность амилазы в семенах и в проростках семян риса и экспериментально показать питательную ценность районированных в Приморском научно-исследовательском институте сельского хозяйства РАСХН сортов риса [1]. В качестве исходного материала использовали пять районированных сортов риса. Работу вели с семенами и проростками. В муке зерна и гомогенатах проростков определяли содержание крахмала, амилозы, амилопектина и активность амилазы. Амилозу определяли по методу Джулиано [2] с некоторыми модификациями. Количественное содержание амилазы определяли фотоколориметрическим методом на спектрофотометре UNICO 1200/1201. Количественное содержание белка определяли биуретовым методом. Экспериментальные данные представлены в таблице 1.
Читать далее…
Геном высших эукариот обеспечивает сложнейшие программы развития и клеточной дифференцировки. Эти программы осуществляются за счет четкой, последовательной активации и инактивации множества генов, белковые продукты которых взаимодействуют друг с другом. Важную роль в регуляции транскрипции играют регуляторные ДНК-элементы. Это энхансеры, которые усиливают транскрипцию; сайленсеры, обеспечивающие репрессионный статус генов; и инсуляторы, для которых показана способность ограничивать активность как энхансеров, так и сайленсеров.
Читать далее…
Стресс-индуцируемые белки – дегидрины были обнаружены первоначально при исследовании созревания устойчивых к высыханию ортодоксальных семян среди специфической гетерогенной группы белков, названных LEA-белками (Late Embryogenesis Abundant), т.е., преобладающими белками позднего эмбриогенеза. Эти белки накапливаются в семядолях и осевых органах созревающих семян на стадии дегидратации. Позже было показано, что дегидрины появляются также и в вегетативных органах растений в ответ на засуху, солевой стресс, холодную акклиматизацию, а также воздействие АБК. Все дегидрины, или LEA-белки, являются чрезвычайно гидрофильными, богатыми глицином и термостабильными белками (они не коагулируют даже при 100°С). В созревающих ортодоксальных семенах эти белки могут составлять до 30% от незапасных клеточных белков и быстро исчезают при прорастании. По современным представлениям, термостабильные белки – дегидрины играют важную роль в стабилизации клеточных структур при высыхании, участвуют в выработке устойчивости к осмотическому стрессу. На основании этого было выдвинуто предположение, что чувствительность к высыханию у рекальцитрантных семян может быть результатом отсутствия у них дегидринов. Однако позже было показано, что дегидрин-подобные белки присутствуют во фракции термостабильных белков в рекальцитрантных семенах. Семена конского каштана (Aesculus hippocastanum L.) не переносят высыхания, то есть относятся к рекальцитрантному типу. С другой стороны, эти семена после опадения с деревьев входят в состояние глубокого физиологического покоя, которое снимается после длительной холодной стратификации, то есть семена конского каштана устойчивы к холодовому стрессу. Исследование белкового комплекса семян конского каштана [1] показало наличие значительного количества термостабильных белков, которые составляют более 30% растворимых белков цитозоля в осевых органах и подавляющую массу (около 80%) белков семядолей. Представляло интерес выявить дегидрины среди термостабильных белков конского каштана. Для этой цели были использованы методы одномерного электрофореза в градиенте ПААГ и Вестерн-блот-анализ. Полученные результаты показали, что во фракции термостабильных белков семян конского каштана присутствуют дегидрин-подобные белки, которые выявлялись в виде одной яркой полосы в зоне молекулярных масс около 50 кД. Низкомолекулярные термостабильные белки, которыми обогащена исследуемая фракция, не давали реакции на дегидрины. Дегидрин-подобные белки обнаружены во всех частях зародыша: в осевых органах, семядолях, черешках семядольных листьев. По-видимому, тканевая специфичность в локализации этих белков отсутствует. Дегидрины выявлялись в тканях семян каштана на протяжении всего периода стратификации, после начала роста зародышевого корешка уменьшалась как фракция термостабильных белков, так и относительное содержание в ней дегидринов. Полученные данные говорят о том, что дегидрины составляют незначительную часть фракции термостабильных белков. Функции остальных термостабильных белков, которые накапливаются в больших количествах в рекальцитрантных семенах конского каштана, остаются неясными и нуждаются в дальнейшем исследовании.
Читать далее…
К настоящему времени известно, что ультрафиолетовая радиация (УФР) вызывает изменения биохимических параметров растительных организмов. В последние годы интенсивно исследуется возможность использования пероксидаз в качестве биоиндикаторов устойчивости растений к абиотическим и антропогенным факторам среды и влияние пероксидаз на процессы ризогенеза через воздействие на ауксиновый, лигниновый и антоциановый метаболизм [2]. Цель данной работы – изучить влияние облучения УФР меристемных регенерантов картофеля на активность пероксидазы и способность к ризогенезу. Исследования выполнены на меристемных регенерантах картофеля сортов Скарб и Одиссей, которые выращивали под источниками света ДНАЗ-400 (λ max=610 нм), фотопериод 16/8 часов, в пластиковых контейнерах на синтетических ионообменных субстратах при температуре 20±20С. Источник УФР – лампа ДРТ – 1000 (λ=240-320 нм). Облучение проводили сразу же после черенкования. Для контроля величины дозы облучения растений использовали УФР – дозиметр ДАУ – 8. Однократная доза облучения УФР меристемных регенерантов картофеля была 120 Дж/м2 или Е1=1,2•105 эрг/м2. Контролем служили идентичные растения, не подвергавшиеся воздействию УФР. Пероксидазную активность и процессы ризогенеза анализировали в контрольных и опытных растениях согласно методике описанной в статье [3]. В ходе проведенного эксперимента установлено, что облучение УФР дозами 120 Дж/м2, 240 Дж/м2 и 360 Дж/м2 способствует резкому увеличению активности пероксидазы в 1 – 3 сутки после облучения, но начиная с 4-5 суток после облучения активность пероксидазы у опытных образцов ниже, чем у контрольных. Облученные растения также характеризовались ускоренным образованием и развитием корней: так, у сорта Одиссей, средняя длина корней (мм) при облучении дозой 120 Дж/м2 на 96% превосходит контроль, а при облучении дозой 240 Дж/м2 и 360 Дж/м2 – на 148 % и 190 % соответственно. Похожая динамика наблюдается и в сорте Скарб. Кроме этого, в ходе эксперимента отмечено, что укоренение контрольных регенерантов в среднем происходит на седьмые сутки после черенкования, а регенеранты облученные УФР укореняются на третьи – четвертые сутки. Таким образом, наибольшая укореняемость меристемных регенерантов наблюдалась на фоне высокой концентрации пероксидазы в листьях картофеля. Инициация придаточных корней на регенерантах растений тесно связана с эндогенным уровнем ауксинов в зоне ризогенеза. В литературе широко обсуждается вопрос о связи процесса ризогенеза, индуцированного природными или синтетическими ауксинами, с активацией ряда ферментных систем. Утверждается, что повышение активности пероксидазы в растительных тканях – типичная ответная реакция на возрастание в них эндогенного уровня ауксинов [1].
Читать далее…
В организмах с универсальным генетическим кодом, 61 смысловой ко дон используется для кодирования 20 природных аминокислот, а три кодона UAA, UAG и UGA, названные стоп-кодонами, служат для остановки белкового синтеза. Известны организмы с вариантными генетическими кодами, в которых изменены значения некоторых стоп-кодонов. Например, в некоторых археях, таких как MeihanosarcinabarkenUAG кодирует особую аминокислоту – пирролизин. У этих архей он встречается в ферментах, являющихся ключевыми для использования метиламинов в качестве источника энергии.
Читать далее…
С каждым годом увеличивается площадь почв с повышенным засолением, одновременно сокращается площадь посева здоровых растений, из-за распространения вирусных заболеваний. Рапс является одним из важнейших масленичных растений. Масло рапса содержит самое низкое количество вредных для здоровья человека насыщенных жирных кислот и широко используется в пищевых и технических целях, кроме того растения рапса обладают относительной солеустойчивостью. В связи с этим необходимо изучать наследование признаков у трансгенных растений рапса в условиях засоления. Эти исследования позволят проследить закрепление и наследование определенного признака у рапса в последующих поколениях. Целью данной работы был анализ трансгенных растений рапса разных конструкций со встроенными генами, а так же выявление закономерностей наследования этих признаков. Для исследования было взято 4 сорта растений рапса со встроенными уже генами. Эти семена были получены при самоопылении трансгенных растений рапса (т.е. это семена поколения Т1). Растения рапса были трансформированнны методом агробактериальной трансформации, вводимыми генами были: 1) ген пролиндегидрогеназы в антисмысловой ориентации (обеспечивает повышение солеустойчивости), 2) гены транспортного белка и белка оболочки вируса табачной мозаики крестоцветных, 3) ген nptII (устойчивость к канамицину). В ходе эксперимента были посажены семена растений рапса разной конструкции (T1). Затем эти растения были расчеренкованы и высажены на среду G1/2. Получено по 40 растений первого поколения с 4-мя различными конструкциями. ДНК выделена примерно из 70 растений. Одновременно начат анализ на наличие встроенных генов методом ПЦР. Проверено 18 растений, из них 3 содержат ген транспортного белка вируса табачной мозаики, 2 – ген устойчивости к канамицину. Предполагается в дальнейшем выделить из оставшихся растений ДНК, и с помощью метода ПЦР и электофореза проверить образцы растений на наличие в них встроенных генов. Полученные данные позволят проследить, наследуется ли устойчивость к различным факторам в следующих поколениях у трансгенных растений рапса.
Загрузка ...