Переохлаждение организма и формирование его устойчивости к холоду остается практически значимой проблемой физиологии и медицины. Кратковременные воздействия низких температур (продолжительностью до 1,5 часов) встречаются довольно часто как в повседневных, так и в экспериментальных ситуациях, но мало данных, касающихся ранних реакций адаптированного организма. Целью данного исследования являлось изучение динамики процессов окисления в крови половозрелых самцов крыс, адаптированных к холодовому воздействию. Для этого 70 половозрелых самцов беспородных белых крыс поодиночке содержали при температуре 4оС в течение 3 часов на протяжении 20 дней. На 21-е сутки крыс охлаждали 15, 30, 45, 60 и 90 минут, отдельно выделяли группу адаптированного и неадаптированного контроля. Промежуточные продукты перекисного окисления липидов (ПП ПОЛ) определяли по методу В.А. Волчегорского и соавторов. Степень перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) – методом А.А. Покровского и А.А. Абразцова в модификации, предложенной А.Е. Лазько, Р.И. Асфандияровым и А.А. Резаевым. Содержание продуктов окисления белков – по методу Е.Е. Дубининой. Динамика ПП ПОЛ отличается значительным увеличением их концентрации к 30 минуте воздействия (р>0,001), их уровень остается повышенным до 60-ой минуты xолодовой экспозиции, затем сокращается и возвращается к контрольным значениям. Уровень ПГЭ, отображающего степень устойчивости мембран эритроцитов к воздействию перекисью, имеет общую тенденцию к понижению, но статистически значимых различий с контролем выявлено не было. К 90-ой минуте экспозиции показатели ПГЭ у половозрелых животных приблизились к показаниям контрольной группы неадаптированных животных, в то время, как базовый уровень адаптированных крыс является более высоким, чем у интактного контроля. Динамика уровня алифатических альдегид-денитрофенилгидразонов основного характера (490 нм) разворачивается относительно завышенного базового уровня адаптированных животных (р<0,001): первые 60 минут охлаждения их концентрация не изменяется. На 90-ой минуте отмечено их значительное сокращение (р<0,001). Для динамики уровня алифатических кетон-динитрофенилгидразонов основного характера (540 нм) характерно колебание их уровня относительно адаптированного контроля: возрастание на 15-ой и 30-ой минутах и падение на 45-ой и 90-ой. Между динамикой продуктов СРО белков выявлен высокий уровень корреляции (r=0,94).
Читать далее…
Эукариотический геном состоит из структурно-функциональных доменов (форум-доменов) длиной 50-200 т.п.н., которые также называют Рс-доменами. Форум-домены были обнаружены как фрагменты эукариотического генома длиной 50-200 т.п.н., образующиеся в результате спонтанной фрагментации хромосом, которая происходит после заплавления клеток в легкоплавкую агарозу и последующем лизисе. Расположенные на их границах области PRE/TRE (Polycomb/Trithorax Response Elements) отвечают за поддержание ранее установившегося транскрипционного состояния связанных с ними генов.
Читать далее…
Аполипопротеин A-I (апоА-I) является главным белковым компонентом липопротеинов высокой плотности человека, которые принимают участие в обратном транспорте холестерина, включая его отток из моноцитов и макрофагов в стенке сосуда. Существуют экспериментальные данные, показывающие, что доставка кДНК апоА-1 человека в составе ретровирусных векторов экспрессии в макрофаги защищает мышей, дефектных по гену аполипопротеина Е, от развития атеросклероза. В то же время, экспрессия эндогенного апоА-I в клетках моноцитарно-макрофагального ряда до настоящего времени не была показана.
Читать далее…
Культура клеток высших растений представляет собой экспериментально созданную популяцию соматических клеток. Помимо использования в фундаментальных исследованиях, культура клеток высших растений является универсальным инструментом для решения многих прикладных задач. В частности, растительные клетки in vitro могут служить источником ценных веществ растительного происхождения. Читать далее…
В последнее время исследователи все чаще направляют свое внимание на использование в составе иммуногенов адъювантов, активирующих врожденный иммунный ответ. Одним из таких иммуномодуляторов является белок флагеллин, основной структурный компонент бактериальной флагеллы. Так, флагеллин Salmonellatyphimuriumбыл успешно применен в качестве адъюванта в таких лабораторных моделях как F1/V антиген Yersiniapestis(возбудитель чумы), 4хМ2е-антиген (4 слитых эпитопа из белка М2 вируса гриппа), белок Sp-1 мерозоита Plasmodiumvivax(возбудитель малярии) и др. Представляется перспективным использовать рекомбинантный флагеллин, как адъювант при создании иммуногенов против Mycobacteriumtuberculosisи ВИЧ-1 субтипа А. Для этого необходимо создать штамм Е. coli, продуцент рекомбинантного белка FHC (флагеллина S. typhymurium) и получить очищенный препарат данного белка.
Читать далее…
Одной из важных проблем современной генной инженерии растений является недостаточность силы большинства известных промоторов, используемых для повышенной и конститутивной экспрессии трансгена, особенно это актуально при использовании трансгенных растений в качестве продуцентов физиологически активных веществ. Одним из основных направлений по получению сильных растительных промоторов являются поиск новых природных промоторов каулимовирусов, их модификация, а также получение различных их гибридных форм, как между собой, так и с другими известными растительными промоторами. Нами были впервые исследованы промоторы каулимовирусов георгина и гвоздики, родственные 35S промотору вируса мозаики цветной капусты. Оказалось, что эти новые промоторы не уступают, а промотор вируса мозаики георгина возможно даже превосходит 35S промотор по активности в
Читать далее…
Агглютинин зародыша пшеницы (АЗП) является хорошо изученным лектином, характерным для зародышей семян и вегетирующих растений пшеницы [1]. По своим свойствам этот белок очень сходен с лектинами других злаковых культур [1], поэтому АЗП считается их типичным представителем. Экзогенная обработка АЗП растений пшеницы стимулирует их рост; в основе такого эффекта АЗП лежат индуцированные лектином перестройки в гормональной системе растения [3]. Такое воздействие АЗП на растения пшеницы может отражать функциональное значение фитолектинов, а может быть лишь частным случаем. Цель нашей работы – выявить эффект обработки АЗП на другие злаковые растения на примере важной сельскохозяйственной культуры – ячменя. Семена ячменя Hordeum vulgare L. (сорт Прерия) проращивали в течение 3 сут на фильтровальной бумаге в кюветах на водопроводной воде. 3-суточные проростки изолировали от эндосперма и выдерживали в течение 24чв стаканах на смеси 2%-ной сахарозы и АЗП в концентрации 1 мг/л. Контрольные растения выращивали на 2%-ной сахарозе. О росте корней 4-суточных проростков судили по митотическому индексу (МИ) меристематической ткани корней – проценту клеток на стадии профазы, метафазы, анафазы и телофазы к общему числу подсчитанных клеток [4]. Содержание свободных форм цитокининов (ЦК) и индолилуксусной кислоты (ИУК) в корнях 4-суточных проростков определяли методом иммуноанализа [2]. Экзогенная обработка растений ячменя АЗП стимулировала деление клеток корня. МИ апикальных клеток корней под воздействием АЗП увеличился почти в два раза и составил 5.4%, тогда как МИ меристематических клеток корней контрольных растений был на уровне 3%. Рост растений находится под контролем гормональной системы. Мы показали, что в ходе обработки лектином в корнях ячменя транзитно накапливались ЦК и ИУК – фитогормоны, которые при совместном использовании в физиологических концентрациях стимулируют деление меристематических клеток растений. Максимум накопления ИУК и ЦК в корнях АЗП-обработанных растений ячменя приходился на 4 ч воздействия лектина и составляет 70% (для ИУК) и 40% (для ЦК) от контрольного уровня. Такое повышение содержания ИУК и ЦК в корнях обработанных АЗП проростков ячменя указывает на важный механизм стимуляции роста клеток корней лектинами, опосредованный изменением содержания эндогенных фитогормонов. Полученные результаты подтверждают участие лектинов в реализации программы роста растений.
Читать далее…
Ранее в нашей лаборатории было показано, что РНК Х-вируса картофеля (ХВК), находящаяся в составе вирусной частицы, не доступна для трансляции invitro. На сегодняшний день известно два пути трансляционной активации инкапсидированной РНК ХВК: фосфорилирование белка оболочки (БО) в составе вирусной частицы или связывание с ней транспортного белка один (ТБ1) ХВК. Следует отметить, что оба механизма исследованы лишь invitro. Нашей задачей является изучение путей трансляционной активации инкапсидированной РНК ХВК invivo.
Читать далее…
Loading ...