Транспорт различных органелл внутри клетки осуществляется белками динеинами и кинезинами. Динеин в клетках тесно связан с мультипептидным комплексом динактином. Динактин увеличивает длину трека непрерывного движения динеина вдоль микротрубочки (МТ) и служит адаптером для взаимодействия динеина с грузами. Одним из компонентов динактинового комплекса является белок р150Glued, молекула которого содержит участок, отвечающий за связывание с МТ. Белок р150Glued существует в виде двух изоформ: 150 кД изоформа-1 и 135 кД изоформа-2, лишенная первых 143 аминокислот. Анализ нуклеотидных баз данных выявил существование еще двух изоформ р150Glued, отличающихся длиной микротрубочко-связывающей области на N-конце. Короткая изоформа (р150-1В) имеет 20-аминокислотную делецию (131-151амк-т) по сравнению с длинной формой (р 150-1 А). Методом RT-PCR нами было показано, что короткая изоформа р150Glued-1В является доминантной во всех тканях, за исключением нервной. В нервных тканях, напротив, преобладает длинная изоформа р150Glued-1А, а в тканях ненервного происхождения она отсутствует. Длинная форма присутствует также в культивируемых фиброластоподобных клетках. Целью нашей работы являлось изучение 2х изоформ, их внутриклеточной локализации, тканеспецифичной экспрессии и влияния на радиальность системы МТ. Исследования проводили на культуре клеток эпителия почки зеленой мартышки Vero. При экспрессии в культивируемых клетках длинной или короткой изоформ р150Glued, слитых с GFP, наблюдали различный характер их распределения вдоль МТ: короткая изоформа белка располагалась в клетке в виде «комет» на плюс-концах МТ. Длина этих комет варьировала в зависимости от уровня экспрессии белка, но никогда не наблюдали распределение по всей длине МТ. Среднее значение длины комет при экспрессии короткой формы составило 2,74 +/- 0,18 мкм. Для сравнения, длина комет эндогенного р150Glued, выявленная окраской моноклональными антителами к белку, составила 2.3 +/- 0.2 мкм. Длинная изоформа декорировала МТ по всей длине, независимо от уровня экспрессии, и при высоком уровне экспрессии вызывала образование пучков МТ. Иммунизацией кролика вариабельным участком р150Glued из 20 аминокислот, слитых с GST, мы получили поликлональные антитела, специфично узнающие длинную изоформу р150-1А. Вестерн-блот с лизатами различных тканей, окрашенный этими антителами и моноклональными антителами к р150Glued, подтвердил тканеспецифичное распределение двух изоформ. Иммунофлуоресцентное окрашивание культивируемых клеток Vero поликлональными антителами выявило локализацию длинной изоформы р 150-1А на центросоме и по всей длине отдельных МТ, причем окрашивались только некоторые МТ клеток. Для изучения сродства разных изоформ р150Glued к МТ было проведено соосаждение in vitro. Для этого N-концевые фрагменты короткой и длинной изоформ р150Glued инкубировали с МТ и осаждали через глицериновую подушку. Количество р150Glued в осадках и супернатантах анализировали путем белкового фореза и окраски гелей по Кумасси.
Читать далее…
Богун А.С.
Одной из нерешенных проблем современной психофизиологии является поиск взаимосвязи между частотно-временными параметрами ЭЭГ и индивидуальными особенностями высших психических функций человека. Особую актуальность данный вопрос приобретает применительно к оценке уровня развития детей и подростков, поскольку именно эти возрастные категории рассматриваются как критический этап онтогенеза, характеризующиеся интенсивными изменениями в ЦНС
Читать далее…
Впоследнее время значительно возрос интерес к изучению роли алкилоксибензолов (АОБ) в процессах, протекающих в организме животных и человека. АОБ являются химически синтезированным аналогами ауторегуляторного фактора анабиоза микроорганизмов (фактора d1). В литературе имеются некоторые сведения о влиянии данных метаболитов на рост культуры клеток ras-трансформированных фибробластов мышей, о способности АОБ изменять активность ферментов. АОБ обладают шапероноподобным действием, являются структурными модификаторами белка. АОБ присутствуют в растениях (фруктах, семенах, зеленых частях), следовательно, могут попадать в организм человека или животных с продуктами питания. Чрезвычайно важно выяснение того, насколько универсальным является действие АОБ по отношению к иммунокомпетентным клеткам организмов, также роли АОБ в работе некоторых звеньев иммунного ответа.
Читать далее…
Появление новых методов в молекулярной биотехнологии открыло возможность для изучения первичной структуры генов и проведения их сравнительного анализа. Метод секвенирования произвел настоящую революцию в решении биотехнологических задач. Информация о последовательностях геномов различных бацилл, в том числе B.subtilis, B.cereus, B.licheniformis, позволяет провести геноинформационный анализ по идентификации прокариотических генов и их окружения. Изучение регуляции экспрессии генов бациллярных протеиназ позволит выяснить их физиологическую роль в клетках бацилл и связь с различными этапами физиологического роста этих бактерий. Целью работы явилось опеределение нуклеотидной последовательности фрагмента геномной ДНК B.intermediusи проведение ее геноинформационного анализа.
Читать далее…
Рудакова Е.А.
Кофеин является наиболее распространенным психоактивным веществом, влияние которого на организм и психику человека вызывает постоянный интерес исследователей [1]. Поэтому целью нашей работы стало изучение влияния разных доз кофеина употребленных перед сном на структуру ночного сна.
Читать далее…
Впоследние годы наибольшее внимание ученых и врачей привлекают исследования природных биоантиоксидантов, нативных биомодуляторов, в том числе убихинона и продуктов пчел, для коррекции интоксикаций различной природы. В связи с этим целью исследования явилось изучение влияния ингаляции суммарного препарата «Апингалин-Q» на некоторые свойства лейкоцитов в крови крыс при отеке легких.
Читать далее…
В настоящее время значительный интерес представляет ферментативный метод элиминации фенольных поллютантов из растворов и сточных вод с использованием оксидоредуктаз (в т.ч. тирозиназы из грибов), выгодно отличающийся от традиционных эффективностью очистки, возможностью применения в мягких условиях, высокой специфичностью. Вместе с тем, промышленное применение тирозиназы ограничено высокой стоимостью, однократностью применения очищенного энзима. Поэтому оптимизация метода с использованием частично очищенного иммобилизованного препарата ТИР является актуальной задачей.
Читать далее…
Божко А.А.
В связи с возросшими в последнее время уровнем техногенного воздействия на территории Сургутского района актуальность изучения лихенофлоры возросла, т. к. многие лишайники могут быть использованы в качестве биоиндикаторов. Особенно важно исследование лишайников заповедных территорий, в связи с огромным значением этих территорий для фонового мониторинга.
Читать далее…
Loading ...