Долгое время методика odd-ball благодаря относительной простоте была одним из наиболее популярных подходов к исследованию механизмов внимания. Именно она позволила выявить электро физиологические феномены, ставшие сегодня классическими, такие как компонент вызванных потенциалов РЗОО. Однако в естественных условиях ситуации, близкие к модели odd-ball, встречаются гораздо реже, чем взаимодействие со сложной зрительной средой, содержащей множество стимулов с различными свойствами. Вторая ситуация может быть промоделирована с использованием задачи зрительного поиска {visualsearchtask). В настоящей работе мы провели сравнение вызванных изменений альфа-подобной активности (8—12 Гц), которые наблюдаются в двух описанных парадигмах.
Читать далее…
Внашей работе мы использовали термостабильную лихеназу LicBМ3 C. thermocellumкак трансляционный репортерный белок-носитель целевых пептидов. Основанием для использования термостабильной лихеназы в качестве репортерного белка-носителя послужили ранее полученные результаты по созданию и изучению экспрессии бифункциональных белков на основе лихеназы LicBМ3. Было показано, что в составе бифункциональных гибридных белков как лихеназа, так и целевые белки сохраняют свои основные свойства.
Читать далее…
Элькина Ю.Л.
Известно, что специфическая форма глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (ГАФД-с), прочно связанная с фиброзным слоем жгутика сперматозоидов, участвует в обеспечении энергией двигательной активности этих клеток. Целью представленной работы было выявление корреляции между активностью ГАФД-с в различных фракциях сперматозоидов человека и их подвижностью, а также поиск соединений, влияющих на подвижность сперматозоидов за счет ингибирования или активации данной дегидрогеназы. Было проведено определение активности ГАФД-с в образцах сперматозоидов человека с разной степенью подвижности. Было показано, что удельная активность в нерастворимой фракции сперматозоидов с низкой подвижностью в 2-3 раза ниже, чем активность в соответствующей фракции сперматозоидов с высокой подвижностью. Эти данные говорят о том, что активность фермента, прочно связанного с фиброзным слоем важна для подвижности сперматозоидов. Было исследовано влияние перекиси водорода на подвижность сперматозоидов. Показано, что после инкубации в присутствии 3 мМ перекиси водорода общая подвижность снижается в 2,3 раза по сравнению с контролем, при этом дегидрогеназная активность нерастворимой фракции полностью исчезает. Было исследовано влияние различных ингибиторов гликолиза и окислительного фосфорилирования (фторид натрия, азид натрия, арсенат натрия и иодацетат) на подвижность сперматозоидов. Данные соединения не оказывали существенного влияния, вероятно, из-за их неспособности проникать внутрь клетки. Полученные данные указывают, что снижение подвижности сперматозоидов может быть связано с окислением сульфгидрильных групп ГАФД-с, причем защита от такого окисления низкомолекулярными тиолами может предотвратить как снижение активности фермента, так и уменьшение подвижности сперматозоидов. Было также проведено сравнительное исследование ГАФД-с сперматозоидов с нормальной морфологией и сперматозоидов с дисплазией фиброзного слоя (ДФС). В отличие от сперматозоидов с нормальными морфологическими характеристиками и подвижностью в образце сперматозоидов с ДФС большая часть фермента экстрагировалась в раствор. Полученные данные говорят о том, что дисплазия фиброзного слоя приводит к нарушению ассоциации ГАФД-с с фиброзным слоем, в результате чего ГАФД-с экстрагируется в раствор существенно легче. Таким образом, повышенное содержание ГАФД-с в экстракте сперматозоидов может служить новым критерием ДФС.
Одним из важнейших белковых регуляторов функций центральной нервной системы является нейротрофический фактор мозга (BDNF). Он играет значительную роль в процессах выживания и дифференцировки нейронов, а также в формировании памяти. BDNF экспрессируется не только в нервной системе, но и в ряде других тканей, в том числе данный белок детектируется в плазме крови и тромбоцитах. Было показано, что в плазме и в сыворотке крови больных при некоторых психических и нейродегенеративных заболеваний (депрессия, шизофрения, паркинсонизм) уровень BDNF понижен. Лечение депрессии с помощью ряда антидепрессантов приводило к постепенной нормализации уровня BDNF. В то же время до сих пор не было получено сведений о влиянии острого стресса на иммунологически определяемый уровень BDNF в плазме крови крыс.
Читать далее…
Латеральные органы растений представляют собой полярные структуры с адаксиальной (верхней) и абаксиальной (нижней) поверхностями. Эти две стороны отличаются друг от друга морфологией клеток эпидермиса и мезофилла. На верхней стороне клетки дифференцируются таким образом, чтобы способность захвата энергии света была оптимальной. Клетки нижней стороны развивают особенности, необходимые для эффективного газового обмена. Поэтому поляризация является критическим прооцессом для развития структуры листа, оптимизированной для фотосинтеза. У A.thalianaидентифицировано несколько семейств генов, участвующих в формировании и дифференцировке клеток адаксиальной и абаксиальной поверхности. Гены класса III HD-ZIP, в особенности PHABULOSA (PHB), PHAVOLUTA (PHV) и REVOLUTA (REV), участвуют в контроле полярности листа. Доминантные мутации phbи phvвызывают суперэкспрессию генов и приводят к превращению абаксиальных частей в адаксиальные и образованию радиально симметричных листьев [1, 2]. Напротив, доминантная мутация rev-10dприводит к нарушению в сосудистой системе в эмбрионе, в результате образуется флоема, окружающая ксилему [2, 3]. Мутации с потерей функции этих генов не показывают никаких заметных эффектов на полярность латеральных органов. Так как гены PHB, PHVи REVпоказывают сходный характер экспрессии, считается, что функция этих генов частично перекрывается в развитии меристемы и поддержании нормальной дифференцировки клеток листа в латеральных органах. В коллекции кафедры генетики МГУ имеется мутант taeniata (tae), выделенный с помощью мутагенеза из расы Blanes [4]. Мутант taeхарактеризуется плейотропными изменениями морфологии, особенно проявлением на листьях новых листьев или иногда даже целых розеток листьев. Часто у этого мутанта наблюдалось нарушение полярности листа, при этом наблюдали оба два варианта изменений: когда верхний край листа преобладал над нижним (как бы наплывал на нижний) и наоборот. Это может объясняться тем, что клетки края листа у мутанта приобретали меристематические свойства, и вместо дифференцировки, приступали к активным делениям, о чем свидетельствовала активная экспрессия гена CYCB1::GUS. В зависимости от положения этих клеток, верхняя или нижняя части «наплывали» друг на друга, соответственно. Также наблюдали нарушение полярности новых формирующихся лопастей на листьях. Проведен анализ экспрессии генов, контролирующих полярность с использованием метода ПЦР в реальном времени. Проанализированы зрелые лист розетки растений мутанта и дикого типа (раса Blanes). Наблюдалось, что уровень экспрессии генов PHB, PHVи REVпочти не изменен, хотя наблюдается нарушение полярности у мутанта tae, что свидетельствует о том, что ген ТАЕ – новый ген, который контролирует поляризацию листа вне зависимости от раннее исследованных генов.
Читать далее…
Федорченко К.Ю.
Проблема получения биотоплива, а также других продуктов переработки микроорганизмами растительных субстратов, в настоящее время стоит достаточно остро. Исследование проводится в свете возможного использования полученных данных в производстве биотоплива из возобновляемого источника (сахаросвекловичной мелассы, которая является отходом сахарного производства). Важность поставленной задачи заключается в сокращении использования нефти и продуктов на ее основе, а также другого ископаемого сырья, путем привлечения альтернативных возобновляемых сырьевых источников, что является одним из решений энергетических и экологических проблем, связанных с современными видами топлива [1].
Читать далее…
Цель исследования заключалась в исследовании содержания аскорбата (АК) и дегидроаскорбата (ДАК) в развивающейся ксилеме лиственницы для определения регулирующей роли в процессе формирования клеточной стенки трахеид ранней и поздней древесины. Объектами исследования служили деревья лиственницы сибирской в возрасте 25 лет, растущие в питомнике Погорельского ОЭП Института леса им. В.Н.Сукачева СО РАН. Образцы брали 5 июня, 30 июня и 5 августа, когда все клетки развивающегося годичного слоя принадлежали либо ранней, либо поздней ксилеме. Отбор образцов производили по методике, разработанной в лаборатории физиологии и биохимии древесных растений Института леса им. В.Н. Сукачева СО РАН. После снятия коры микрорассечением отбирали слои камбия растягивающихся, созревающих и зрелых клеток, контролируя чистоту выделения слоев под микроскопом. Созревающие клетки делили на слой отложения вторичной стенки, до лигнификации, а также два последовательных слоя лигнифицирующихся клеток при формировании ранней и три последовательных слоя лигнифицирующихся клеток при формировании поздней древесины. В начале июня были получены слои клеток камбия и двух частей зоны роста растяжением. Материал подвергали немедленной фиксации 96%-ным этанолом, а затем исчерпывающей экстракции 80%-ным водным этанолом. Полученный раствор выпаривали и обрабатывали водой до полного растворения. Водный экстракт анализировали на содержание АК и ДАК по модифицированным методам J.H. Roe и M.J. Oesterling и В.В. Соколовского. Содержание АК и ДАК рассчитывали на абсолютно сухой вес ткани и на клетку. Содержание АК и ДАК изменяется в ходе дифференциации клеток ранней и поздней ксилемы. В камбиальной зоне количество АК и ДАК находится в зависимости от меристематической активности камбия в течение сезона вегетации. Более низкое содержание АК и ДАК при образовании поздней ксилемы соответствует низкой интенсивности деления клеток в августе. В зоне роста растяжением их содержание определяет скорость роста трахеид. Ограничение роста связано с участием АК в регулировании образования диферуловых мостиков, сопровождающих прекращение роста первичных стенок. Повышенное количество ДАК в зоне роста растяжением поздних трахеид указывает на активно идущие процессы окисления, связанные с образованием диферуловых мостиков и, следовательно, с ограничением роста. С началом процесса лигнификации в зоне созревания ранних и поздних трахеид количества АК и особенно ДАК меняются в противоположных направлениях. Содержание и соотношение АК и ДАК указывает на направленность окислительно-восстановительных реакций и степень их участия в окислении и использовании фенолокислот в лигнификации ксилемы. Повышенный по сравнению с АК уровень ДАК перед лигнификацией ранних трахеид препятствует полимеризации фенолов. В поздней древесине в той же зоне большое содержание АК и низкое содержание ДАК, что, вероятно, связано с отсутствием АК в апопласте, и может способствовать интенсивному накоплению предшественников лигнина. Таким образом, установлено, что рост первичных стенок трахеид ранней и поздней древесины, а также развитие их вторичных стенок, сопровождающийся лигнификацией, зависит от соотношения АК/ДАК.
Фасхутдинова А.А.
Апоптоз – широко распространенный и строго контролируемый процесс инициируемый многими внешними и внутренними факторами. Известно, что многие цитостатические агенты способны индуцировать запуск апоптотических процессов. Одним из неотъемлемых событий этого процесса является активация каскада ферментативных реакций с участием внутриклеточных цистеиновых протеиназ-каспаз. Мы исследовали цитоксичность сочетания таких широко распространенных антиоксидантов-тиолов как глутатион (GSH), дитиотрейтол (DTT) и N-ацетилцистеин (NAC) с витамином Bia, на опухолевых клетках HL60 invitro.
Читать далее…
Loading ...