BioScience Blog – Научный Биологический блог

Известно, что интерлейкин-6 (IL-6) относится к многофункциональным цитокинам и стимулирует пролиферацию Т-лимфоцитов, макрофагов, эндотелиальных клеток. Помимо этого он может выступать как фактор роста и дифференцировки В-лимфоцитов, гепатоцитов и клеток нейронального ряда.

Действие IL-6 на клетки опосредовано рецептором gp80, который расположен на внешней мембране. Сначала IL-6 связывается с gp80, затем комплекс взаимодействует с рецептором gp130. Тример IL-6/gp80/gp130 не является функциональным. Ключевой стадией передачи сигнала является димеризация триммера, что определяет сближение цитоплазматических доменов gp130 и активацию ассоциированных с ними протеин-фосфокиназ.

В исследовании используются клеточные линии и первичные культуры клеток мыши, крысы, свиньи и человека. В связи с этим возникает необходимость сравнительного структурного анализа IL-6 и его рецепторов данных организмов.

Трёхмерная структура комплекса IL-6 с рецепторами gp80 и gp130 разрешена рентгеноструктурным анализом. Используя файл PDB 1p9m, мы аннотировали контакты IL-6 c его рецептором gp80. Для IL-6 и gp80 проведено выравнивание первичных структур в ряду мышь/крыса/свинья/человек. Кроме нейтральных замен по консервативным участкам, наиболее интересными оказались полярные замены с изменением знака заряда в зоне контакта: положительно-заряженных аминокислот на отрицательные, например, для указанного ряда организмов для IL-6: D/D/K/K и для gp80: H/Q/E/Q в одном положении. На основании аннотации мы предполагаем наличие ошибки (H) в опубликованной последовательности gp80 мыши.

Для нейральных опухолевых клетках исследовали возможность индукции экспрессии глиального фибриллярного кислого белка (GFAP), который является маркерным белком астроцитов. Использовали три линии клеток – нейробластома человека IMR32, нейробластома человека BE(2)-C, глиома крысы C6, гибрид С6 и нейробластомы мыши. Экспрессию GFAP детектировали иммуноцитохимически, и с помощью Вертерн-блот-анализа.