BioScience Blog – Научный Биологический блог

При работе с каллусными и суспензионными культурами клеток растений необходимо знать их жизнеспособность как во время культивирования, так и для выявления их реакции на действия благоприятного факторов. Известен ряд методов, позволяющих определить жизнеспособность тканей растений и выразить ее в определенных величинах. Каждый из методов имеет свои недостатки и преимущества. Главным недостатков всех существующих метод является длительность во времени (от 5 часов до недели). Поэтому разработка новых вариантов определения жизнеспособности каллусных и суспензионных культур является актуальной задачей. Целью нашей работы – оценить жизнеспособность каллусной и суспензионной культуры CentaureascabiosaL. (василек шероховатый) в течение культивирования в нормальных условиях при помощи нового недавно предложенного субстратного метода определения суммарной ферментной активности клеток и сравнение полученных данных с таковыми известных методов. В качестве субстрата была выбрана сахароза, как в сравнительном методе. Кроме того, исследована реакция анализируемых объектов на другие углеводы. Обнаружено, что внесение субстрата углеводного типа в анализируемую среду приводит к изменению электропроводности вследствие протекания ферментативных реакций по утилизации углеводов. Отношение скорости изменения электропроводности во времени отнесенная к количеству клеток есть константа суммарной ферментативной реакции и пропорциональна активности культуры к внесенному субстрату. Полученные значения константы скорости реакции коррелируют с жизнеспособностью клеток по известному методу. Таким образом, предложен экспрессный метод определения жизнеспособности суспензионных и каллусных культур, основанный на изменении электропроводности культуральной среды клеток после внесения субстратов углеводного типа.