БаеваТ.А., Небогатиков В.О., Гейн С.В. ВЛИЯНИЕ β-ЭНДОРФИНА НА ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРИ СИСТЕМНОЙ ИММУНИЗАЦИИ IN VIVO
Эндогенная опиоидная система, наиболее активным и полифункциональным представителем которой является β-эндорфин, уже более 25 лет исследуется в аспекте ее роли в регуляции иммуногенеза. Однако до сих пор не существует четкой картины, иллюстрирующей опиатэргические процессы, протекающие при развитии иммунных реакций. Безусловно, есть и значительные успехи в этом направлении — так, уже сейчас, естественные и синтетические лиганды опиатных рецепторов широко используются в терапии различных заболеваний, при этом ряд из них является перспективным для использования в качестве иммуномодуляторов. Основная масса представленных в литературе результатов получена в системе in vitro, что не даёт возможности экстраполировать полученные данные на организм в целом лагодаря наличию in vivo многоуровневых регуляторных систем, процессов межклеточной кооперации, которые крайне трудно искусственно воссоздать в пробирке. Поэтому мы считаем крайне важным проведение дальнейших исследований в этой области на модели in vivo для более полного раскрытия свойств опиатэргической системы и опосредуемых ею эффектов на организменном уровне, что может внести весомый вклад в развитие современной медицины и биологии.
Цель работы — оценить эффекты β-эндорфина на формирование и функциональную активность антителобразующих клеток (АОК) селезенки мыши при системной иммунизации эритроцитами барана.
Эксперимент был выполнен на беспородных мышах-самцах, массой 17-22 г. Животным внутрибрюшинно вводился β-эндорфин в разовой дозе 100, 1, 0,01, 0,005 мкг/кг массы, контрольным животным вводилось эквиобъемное количество физиологического раствора. Выбор доз препарата основывался на ранее проведенных исследованиях [1]. Через час после введения пептида животных иммунизировали внутрибрюшинно эритроцитами барана (ЭБ), в разовой дозе 108 клеток/0,2 мл физ.раствора [2].
На пятые сутки экспериментальных животных декапитировали под эфирным наркозом. Селезенку гомогенизировали, определяли количество АОК в суспензии спленоцитов методом локального гемолиза в геле агарозы [3] и титр антиэритроцитарных антител в плазме крови [4].
Статистический анализ проводили с использованием однофакторного дисперсионного анализа, непарного t-критерия Стьюдента. Все данные на рисунках представлены в виде средней иртной её станда ошибки (M±m).
Установлено, что β-эндорфин в дозах 1, 0,01 и 0,0005 мкг/кг массы тела статистически значимо увеличивал количество АОК в селезенке экспериментальных животных. Наиболее сильный эффект был зарегистрирован в группах мышей, которым вводили пептид в дозе 0,01 мкг/кг массы тела. Введение высокой дозы (100 мкг/кг), напротив, снижало количество АОК, однако эффект оказался статистически незначимым (рис. 1). Идентичная зависимость «доза-эффект» была получена при анализе влияния β-эндорфина на титр антител к эритроцитам барана в плазме периферической крови мышей. Как видно из рис. 2, в ответ на введение 1, 0,01 и 0,005 мкг/кг β-эндорфина в опытных группах наблюдалось статистически значимое увеличение уровня антиэритроцитарных нтитела в плазме крови. Введение животным пептида в дозе 100 мкг/кг не оказывало достоверного эффекта на титр антител к ЭБ, было отмечено некоторое, статистически незначимое, снижение уровня антиэритроцитарных иммуноглобулинов (рис. 2).
Таким образом, β-эндорфин в низких дозах обладает выраженным стимулирующим эффектом на количество АОК в суспензии мышиных спленоцитов, а также на уровень антиэритроцитарных антител в периферической крови при системной иммунизации экспериментальных животных эритроцитами барана. Стимулирующее влияние низких доз
β-эндорфина на количество антителопродуцентов in vivo вполне согласуется с его способностью активировать в системе in vitro пролиферацию лимфоцитов и продукцию IL-4, цитокина, необходимого для формирования гуморального иммунного ответа [1,5].
Литература
1. Гейн С.В. и др. Влияние b-эндорфина на антителогенез и продукцию ИЛ-4 в условиях блокады опиатных рецепторов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2006. — Т. 142, № 8. — С. 192-195.
2. Гусев Е.Ю. Взаимоотношения клеточноопосредованного и гуморального иммунного ответа на уровне целостного организма: Автореф. дис…. д-ра мед. наук. — Москва, 1996. — 36 с.
3. Jerne N.K., Nordin A.A. Plaque formation in agar by single antibody-producing cells // Science. – 1963. – V. 140, № 3365. – P. 405-405.
4. Линг Н.Р., Кэтти Д. Гемагглютинация и реакция антителозависимого лизиса // Антитела. Методы. — М.: Мир, 1991. — 288 с.
5. Гейн С.В., Баева Т.А. Роль опиоидных пептидов в регуляции пролиферации лимфоцитов и изменении Тh1/Тh2 цитокинового профиля // Проблемы эндокринологии. – 2005. – № 5. – С. 49-51.
Загрузка ...