BioScience Blog – Научный Биологический блог

Развитие устойчивости к лекарственным препаратам у М. tuberculosisявляется угрозой общественному здоровью. Быстрая диагностика, а также правильное лечение помогут предотвратить возникновение и распространение туберкулеза (ТБ) с множественной и широкой лекарственной устойчивостью (МЛУ и ШЛУ). Перспективным направлением в выявлении лекарственно-устойчивых форм ТБ является внедрение молекулярных методов детекции мутаций, ассоциированных с резистентностью к противотуберкулезным препаратам. Одним из признаков ШЛУ является устойчивость к офлоксацину, которую связывают с мутациями в генах gyrAи gyrB. По литературным данным, мутации в gyrBвстречаются реже чем в gyrA. Целью исследования было определение частоты мутаций в гене gyrAу изолятов М. tuberculosis, устойчивых к офлосацину, выявленных в Санкт-Петербурге в 2008 году. Исследование проводили с чистыми культурами М. tuberculosis, обладающими ШЛУ по данным метода абсолютных концентраций с использованием плотных питательных сред. Для детекции мутаций резистентности к офлоксацину был амплифицирован фрагмент gyrA, мутации в котором связывают с наличием устойчивостью к офлоксацину. Далее продукты ПЦР секвенировали. У 24 из 26 проанализированных изолятов (92%) была обнаружена замена в 95 кодоне, приводящая к замене серина на треонин. По литературным данным, данная мутация является естественным полиморфизмом у М. tuberculosisи не приводит к развитию устойчивости. Одиннадцать из изученных изолятов обладали мутацией в 94 кодоне (45,8%), а у 3 из 24 изолятов (12,5%) была мутация в 90 кодоне. Один изолят обладал заменой в 91 кодоне. У двух образцов, несмотря на наличие устойчивости, показанной культуральным тестом, мутаций в гене gyrAобнаружено не было. В контрольных образцах, не имеющих устойчивости к офлоксацину, не было обнаружено замен, кроме естественного полиморфизма в 95 кодоне. Полученные данные согласуются с данными из литературы. Мутации в ко донах 90, 91, 94 являются характерными для штаммов, устойчивых к фторхинолону.