ИНАКТИВАЦИЯ ДНК-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА SAK189 STREPTOCOCCUS AGALACTIAE ИНГИБИРУЕТ ЭКСПРЕССИЮ БЕЛКА ВАС
Рождественская А.С., Дмитриев А.В.
НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург (Россия).
E-mail: arozhdestvenskaya@yandex. ru
Streptococcusagalactiae(стрептококк группы В) способен колонизировать многие ткани человека и животных. Этот микроорганизм быстро адаптируется к изменяющимся условиям окружающей среды, используя различные регуляторные механизмы. Одним из таких механизмов является регуляция транскрипции генов двухкомпонентными регуляторными системами. Недавно была обнаружена новая двухкомпонентная регуляторная система S. agalactiae, гены которой, кодирующие гистидинкиназу (sak188) и ДНК-связывающий белок (sak189), находились в пределах "островка" патогенности рядом с геном bac. Белок Вас, связывающий IgA человека и фактор Н комплемента человека, признан одним из факторов вирулентности S. agalactiae. Учитывая смежное расположение генов sak189 и bac, мы предположили, что ДНК-связывающий белок Sak189 влияет на экспрессию белка Вас.
В настоящей работе методом инсерционного мутагенеза ген sak189 был инактивирован у штамма S. agalactiae168/00. Инактивация этого гена привела к изменению динамики роста мутантного штамма на ранних фазах по сравнению со штаммом дикого типа. Кроме того, анализ клеточных лизатов мутантного штамма и штамма 168/00 с помощью SDS-PAGE выявил отсутствие экспрессии белка Вас в мутантном штамме, что было подтверждено Western-блоттингом. Вирулентность штаммов оценивали при внутрибрюшинном заражении лабораторных мышей. Было показано, что инактивация гена sak189 приводит к значительному увеличению вирулентных свойств S. agalactiae.
Таким образом, ДНК-связывающий белок Sak189 S. agalactiaeнеобходим для экспрессии белка Вас, а инактивация гена sak189 влияет на вирулентные свойства S. agalactiae.