ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ИНГИБИРОВАНИЯ ТРАНСЛЯЦИИ мРНК YB-1 ПРИ ЕЕ ПОЛИАДЕНИЛИРОВАНИИ
Елисеева И.А., Лябин Д.Н., Овчинников Л.П.
Институт белка, Пущино (Россия).
E-mail: eliseevaia@rambler.ru
Мультифункциональный белок эукариот YB-1 участвует почти во всех ДНК – и мРНК-зависимых процессах в клетке. Ранее в нашей лаборатории было показано, что регуляция синтеза YB-1 invitroосуществляется через конкурентное связывание YB-1 (ингибирование трансляции) и поли(А)-связывающего белка PABP (стимуляция трансляции) с регуляторной последовательностью в 3′ нетранслируемой области (3′ НТО) мРНК YB-1. Кроме того, было обнаружено, что полиаденилирование мРНК YB-1 снижает ее трансляционную активность, предположительно за счет образования циклической структуры в 3′-концевой части молекулы мРНК YB-1 (поли(А) – белки лизата ретикулоцитов – регуляторная последовательность в 3′ НТО).
В данной работе мы показали, что (1) ингибирующее действие поли(А)-хвоста на трансляцию мРНК YB-1 не зависит от нуклеотидной последовательности спейсера между регуляторной последовательностью и поли(А)-хвостом, а зависит от его длины; (2) ингибирование трансляции мРНК YB-1 при ее полиаденилировании наблюдается только на кэпированной мРНК.
С другой стороны, было обнаружено, что eIF4G связывается с поли(А)+ мРНК люциферазы заметно лучше, чем с поли(А)-, благодаря, по-видимому, связанному с поли(А)-хвостом PABP. Однако мРНК YB-1 как поли(А)-, так и поли(А)+ связывает одинаковое количество eIF4G. Кроме того, мы обнаружили специфическое PABP-незавимое взаиможействие eIF4G с 3′ НТО мРНК YB-1.
Полученные результаты должны помочь нам в понимании механизма регуляции трансляции мРНК YB-1.