ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТЕКТИВНОГО ЭФФЕКТА НОКАУТНЫХ МУТАНТОВ ПО RPF РЕГИОНУ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS ПРИ АЭРОЗОЛЬНОМ ЗАРАЖЕНИИ МЫШЕЙ
Шрамко П.А., Потапов В.Д.
ФГУН ГНЦ ПМБ Федеральной службы Роспотребнадзора, Оболенск (Россия). E-mail: shramko99@mail.ru
В задачи нашей работы входило изучение протективного эффекта иммунизации мышей нокаутными по трем генам rpfрегиона мутантами MycobacteriumtuberculosisH37 RV. Эти штаммы, в отличие от стандартной вакцины BCG, лишены возможности продукции белков, определяющих переход дормантных форм возбудителя туберкулеза в активные, даже при иммуносупрессии.
Протективный эффект изучался на штаммах ДABC, ДACD с делециями соответствующих rpfгенов и сравнивался с протективным эффектом вакцины BCG. Подопытных мышей (ВАLB/с) сначала иммунизировали штаммами ДABC, ДACD и BCG с концентраций около 5Ч105 колониеобразующих единиц (КОЕ) на животное подкожно.
Через тридцать дней иммунизированные таким образом мыши аэрозольно заражались высоковирулентным штаммом Н37 RV (1.2Ч106). Анализ результатов проводился методом высева микроорганизмов из гомогенизированного препарата легких, и подсчета количества КОЕ через 10, 30 и 90 дней после иммунизации. Во всех случаях инфекция достигала максимума к 30 дню после заражения вирулентным штаммом, но если для иммунизированных животных величина КОЕ составляла около 1-3Ч105, то в неиммунизированном контроле достигала 4Ч106. К 90 дню уровень КОЕ животных, иммунизированных штаммами ДABC и BCG, оставался равным 1-2.5Ч105, а у мышей, иммунизированных штаммом ДACD, понизился до 2.2Ч104. Данные по выживанию животных более наглядны, из 24 животных, отобранных на каждый эксперимент, без иммунизации пало 14 мышей; при иммунизации BCG – 4 мыши; для штаммов иммунизированных нокаутными мутантами ДABC и ДACD падеж составил 2 и 0 животных соответственно.
Из полученных результатов можно сделать вывод, что исследуемые мутантные штаммы обладают сравнимым с BCG протективным эффектом.