Институт белка РАН, Пущино (Россия), National Cancer Institute, Фредерик (США).
E-mail: kav-20@rambler.ru
5S рРНК-белковый комплекс является неотъемлемой частью рибосом всех известных организмов. Один из наиболее консервативных компонентов данного комплекса – рибосомный белок L5. Ген этого белка обнаружен у представителей всех доменов жизни. Недавно нами было показано, что белок L5 строго необходим для выживания клеток Escherichiacoli. Однако, конкретная роль этого белка в формировании и функционировании рибосомы до сих пор неясна.
В данной работе был создан штамм E. coliс делецией хромосомного гена белка L5. Жизнедеятельность штамма поддерживалась за счет регулируемой экспрессии гена белка L5 intrans. Большие рибосомные субчастицы этого штамма, собирающиеся invivoв отсутствие белка L5, имеют коэффициент седиментации 47S и не способны ассоциировать с малыми рибосомными субчастицами invitro. Полученные 47S рибосомные субчастицы лишены белка L5, а также содержат лишь следовые количества 5S рРНК и рибосомных белков L18, L25, L16 и L27. Кроме этого, были получены и охарактеризованы рибосомы E. coli, содержащие белок L5 с мутациями в участке, контактирующем с тРНК в Р-сайте рибосомы.