BioScience Blog – Научный Биологический блог

Адипонектин (Acrp30, apM1), белковый гормон массой 26 кДа, выделяемый жировой тканью, регулирует катаболизм жирных кислот, чувствительность к инсулину, уровень глюкозы в крови, оказывает влияние на воспалительные и другие процессы в тканя. Адипонектин секретируется в кровь в необычно высокой для гормона концентрации и составляет ≈0,01% от общего белка крови. Перед секрецией из адипоцита адипонектин подвергается посттрансляционной модификации (гидроксилирование, гликозилирование и олигомеризация), и в крови присутствует в виде гомомультимеров: тримеров (LMW-форма), гексамеров (MMW-форма) и высокомолекулярных комплексов (HMW-форма). Установлено, что разные олигомерные формы адипонектина взаимодействуют с различными рецепторами в тканях-мишенях и тем самым оказывают многообразное влияние на метаболические процессы в организме. Многие авторы отмечают особую роль HMW олигомера адипонектина в реализации основных биологических функций данного белка. Было также показано, что концентрация HMW формы адипонектина в крови коррелирует с такими заболеваниями как ожирение, диабет второго типа, сердечно-сосудистые заболевания и метаболический синдром, что говорит о возможности использования адипонектина в качестве потенциального диагоностического маркера данных заболеваний.

Используя рекомбинантный и нативный (выделенный из сыворотки крови человека) адипонектин в качестве иммуногена, мы получили панель мышиных моноклональных антител, способных взаимодействовать с адипонектином в сыворотке крови. Проведя серию дополнительных экспериментов, мы установили, что несколько пар антител пригодны для количественного определения адипонектина в сыворотке крови при помощи сандвич-иммуноанализа с флуоресцентной меткой (Eu3+). Кроме того, проведя разделение белков сыворотки крови на фракции с помощью метода гель-фильтрации, мы показали, что одна из полученных пар антител (пара 20-23) способна избирательно взаимодействовать с HMW-формой адипонектина, в то время как другая пара антител (пара 36-27) узнает все три олигомерные формы адипонектина. Используя полученные пары антител, мы провели предварительные эксперименты по определению уровня адипонектина в крови здоровых людей и больных диабетом второго типа. Нами показана корреляция уровня HMW-формы адипонектина с данным заболеванием.

Полученные нами результаты говорят о возможности использования данных пар моноклональных антител в качестве эффективного инструмента для исследования различных молекулярных механизмов воздействия адипонектина на ткани-мишени, а также принципиальную возможность их применения для клинических исследований инсулинорезистентности и диабета второго типа.