Лапаев С. С. Получение и культивирование нервных клеток головного мозга эмбрионов мыши
Клеточные культуры являются наиболее удобной и безопасной моделью для различного рода исследований, в том числе и исследований инфекционной активности прионов. Создание этих линии послужило моделью для более глубокого изучения нейропатологий человека и животных.
Целью проведенной работы было изучение возможности создания модельной клеточной линии нервных клеток из головного мозга эмбрионов мыши для последующего исследования культивирования на ней прионных агентов скрепи.
Головной мозг получали из эмбрионов мыши на 18-ом дне гестации. Предварительно отмытые клетки ресуспендировали в культуральной среде ДМЕМ с 10% фетальной сыворотки теленка.
Для дифференцировки полученных клеток первичной культуры использовали кондиционную среду, полученную в результате культивирования первичной культуры эмбриональных фибробластов мыши, а также среду ДМЕМ с 5% фетальной сыворотки теленка.
В результате проведенных работ была получена культура нервных клеток из головного мозга эмбрионов мыши перспективная для дальнейших исследований культивирования на них инфекционных прионных агентов.
Для использования полученных нервных клеток головного мозга эмбрионов мыши в дальнейшем, они были заложены на хранение методом криоконсервации в условиях жидкого азота с использованием, в качестве криопротектора, глицерина.
Полученные клеточные культуры нервных клеток представляют интерес для дальнейших исследований молекулярных основ амилоидогенеза и функций клеточных предшественников прионов, синтезируемых клетками нервной ткани. Созданные модельные культуры клеток могут быть использованы при разработке средств диагностики и лечения нейродегенеративных болезней человека и животных, вызываемых нарушением конформационных матриц молекул клеточных белков, а так же для проведения ряда лабораторных работ по изучению биохимических, физиологических и других свойств нервной ткани человека и животных.
Литература
1. Покровский В.И., Киселёв О.И., Черкасский Б.Л. (2004) Прионы и прионные болезни. СПб.
2. В.А. Яворская, Н.П. Волошина, В.В. Хвисюк, и др. (2004) Получение нейробластов из стромальных клеток костного мозга и их клиническое применение при некоторых заболеваниях нервной системы. // Трансплантология. Интернет-ресурс.
3. Л.Д. Любич, М.И. Лисяный. (2004) Получение, культивирование и индукция дифференцировки эмбриональных нейроклеток // Трансплантология. Интернет-ресурс.
4. Полтавцева Р.А., Марей М.В., Дубровина И.В. и др. (2001) Анализ развития стволовых нейральных клеток человека in vitro // Цитология. Cytology. T. 43.
5. Л. П. Дьяконов, В. И. Ситьков. (2000) Животная клетка в культуре. М.: СПУТНИК.
Loading ...