ОЦЕНКА МОРФОМЕТРИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК ЭРИТРОЦИТОВ ПОЗВОНОЧНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ПОВЫШЕНИИ ТЕМПЕРАТУРЫ ИНКУБАЦИИ КЛЕТОК IN VITRO МЕТОДОМ АСМ
Забиняков Н.А.
БелГУ, Белгород (Россия).
E-mail: serious2x@rambler.ru
Целью исследования было изучение морфометрических характеристик клеток крови позвоночных животных при температурных воздействиях invitro. Объектом исследования служили ядерные эритроциты представителей классов Рыб, Земноводных и Птиц. Изучали морфометрические характеристики клеток (площадь, объем, высоту, длинные и короткие оси клеток) на свежеприготовленных мазках крови с помощью метода АСМ на сканирующем зондовом микроскопе Интегра Вита NT-MDT. Сканировали нативные клетки в условиях, предотвращающих их высыхание при комнатной температуре и нативные клетки, прошедшие инкубацию в течение 30 минут при повышенной температуре invitro. Для рыб и лягушек температура инкубации составила 37°С, для птиц – 42°С. Изображения эритроцитов были получены в режиме полуконтактного сканирования с помощью кремниевых зондов серии NSG03 (NT-MDT), жесткостью 1,1 Н/м с радиусом закругления 10 нм. Статистическую обработку полученных результатов осуществляли с использованием критерия Стьюдента.
В результате проведенных исследований установлено, что у представителей класса Рыб при повышении температуры инкубации клеток крови до 37° С наблюдается снижение площади и высоты на 12,28% (р<0,05) и 10,71% (р<0,05) и увеличение объема на 30,19% (р<0,05) соответственно в сравнении с интактными клетками. У представителей класса Земноводных при увеличении температуры инкубации регистрируется снижение объема и высоты на 25,69% (р<0,05) и 21,01% (р<0,05) % в сравнении с интактными эритроцитами. У Птиц повышение температуры вызывает тенденцию к увеличению морфометрических параметров изучаемых клеток крови, однако данные статистически недостоверны.
Сравнивая полученные результаты морфометрических характеристик клеток крови при воздействии повышенной температуры в опытах invitro, можно предположить, что ведущими факторами, вызывающими изменения, являются свойства мембраны, которые определяются фазовыми переходами билипидного слоя плазмалеммы с разной критической точкой у представителей теплокровных и холоднокровных животных.