ПОЛУЧЕНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО АЛЬБУМИН-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА
Бормотова Е.А., Гупалова Т.В.
Научно-исследовательский Институт экспериментальной медицины Северо-западное отделение РАМН, Санкт-Петербург (Россия). E-mail: tvgupalova@rambler.ru
Клеточная мембрана стрептококков содержит рецепторные белки, способные взаимодействовать с белковыми факторами крови человека. Среди рецепторов стрептококков групп C и G интерес представляет белок G, полноразмерная молекула которого обладает способностью связывать иммуноглобулин G (IgG) человека и различных млекопитающих, а также сывороточный альбумин человека и животных. В настоящее время разработаны генно-инженерные технологии получения апатогенных продуцентов белка G и современные методы его выделения из бактериального детрита, а также накоплена информация о его структуре. Изучено взаимодействие белка G с IgG и альбумином. Однако некоторые штаммы стрептококков группы G, выделенные из коровьего молока, могут связывать только сывороточный альбумин. В настоящей работе ген, кодирующий альбумин-связывающий белок штамма стрептококка группы G, выделенного из коровьего молока (штамм G 13) был клонирован и экспрессирован в Escherichiacoli. Анализ нуклеотидной последовательности этого фрагмента гена обнаружил уникальную NH2 – терминальную последовательность и три типа повторов в кодируемом белке. Один из этих повторов имеет значительную гомологию с альбумин-связывающими доменами белка G. Был выделен и очищен рекомбинантный 50-кДа альбумин-связывающий белок. Показано, что этот белок способен связывать альбумин человека с гораздо большей активностью, чем белок G. Это позволило использовать этот белок, как в клинической медицине, так и для целей биотехнологии: 1) в диагностических тест-системах для определения уровня альбумина в биологических жидкостях человека; 2) для удаления альбумина из сыворотки крови человека, которую затем можно использовать в протеомных исследованиях; 3) для получения очищенного препарата альбумина аффинной хроматографией на сорбенте, связанным с рекомбинантным альбумин-связывающим белком.