ПОЛУЧЕНИЕ КОНЬЮГАТОВ ПЕПТИДА СЕМАКСА С БЫЧЬИМ СЫВОРОТОЧНЫМ АЛЬБУМИНОМ
Воробьева М.Б., Мартынова К.В., Шрам С.И.
Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова, Москва (Россия),
Учреждение Российской академии наук Институт молекулярной генетики РАН, Москва (Россия).
E-mail: vorobevamaria@gmail.com
Более 20 лет назад в Институте молекулярной генетики РАН был разработан и внедрен в производство препарат на основе пептида семакса (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro), обладающего выраженным ноотропным и нейропротективным действием. Несмотря на интенсивное исследование механизмов действия семакса, мишени его на нервных клетках пока не выявлены. Для решения этой задачи нами был предложен метод фотоаффинного мечения. Ранее нами были получены биологически активные фотоаффинные зонды на основе семакса. Для выявления и выделения комплексов пептида с белками-мишенями удобно использовать антитела к семаксу.
Для получения антител к низкомолекулярным соединениям в качестве антигенов традиционно используют их коньюгаты с белками. Коньюгаты для иммунизации получали конденсацией семакса и бычьего сывороточного альбумина с применением сшивающих агентов – глутарового альдегида (ГА) и диметилсуберимидата (ДМС). Среднее соотношение пептид/белок в коньюгатах, полученных с использованием ГА и ДМС, по данным MALDI масс-спектрометрического анализа оказалось равным 5:1 и 1:1 соответственно. В случае использования ГА наблюдали образование значительных количеств побочных продуктов, поэтому коньюгат дополнительно очищали с использованием гель-проникающей хроматографии. Выход продукта составил ок. 10 мг.
Loading ...