Полякова М.М. Физиолого-биохимические особенности диких штаммов дрожжей
Из всех известных микроорганизмов дрожжи могут быть отнесены к одним из наиболее ценных в практическом отношении. Дрожжи являются хемоорганогетеротрофами и используют органические соединения, как для получения энергии, так и в качестве источника углерода. При практическом применении дрожжей важное значение имеют продукты их вторичного метаболизма, выделяемые в среду в малых количествах: сивушные масла, ацетон, диацетил, масляный альдегид, изоамиловый спирт, диметилсульфид и другие. Целью работы было выявление амилолитической, протеолитической, уреазной активности и рост на безвитаминной среде. Выделено 16 штаммов дрожжей с листьев и коры плодовых деревьев. Пробы отбирались в соответствии с правилами асептики, время отбора проб сентябрь 2008 года, место отбора проб – садовый участок в районе села Три протока Астраханской области. Дрожжи выделяли с помощью среды Сабуро с добавлением антибиотиков, для предотвращения роста бактерий. Выделены 16 штаммов дрожжей с различными
морфологическими признаками с листьев, плодов и коры различных плодовых деревьев: Prunusavium, Prunuspumila, Prunusarmeniaca, Prunuscerasus, Prunuscerasifera, Pyrusdomestica, Elaeagnusangustifolia. Способность дрожжей синтезировать все необходимые для роста витамины или потребность в наличии каких-нибудь из них является одной из характеристик дрожжей. Культивирование осуществляли на специальной безвитаминной среде. Наблюдали рост всех дрожжей. С помощью качественных реакций были обнаружены витамины Bi (тиамин) и А (ретинол). Витамин Bi выделяли все штаммы, кроме штамма 9. Витамин А синтезировали штаммы 1, 4, 5, 6, 7,10. Витамин Вг (рибофлавин) дрожжи не синтезировали. Многие дрожжи способны разлагать мочевину при относительно высоком ее содержании в среде. Для выявления этой способности используют среду Христенсена. В большинстве случаев уреазной активностью обладают базидиомицетные дрожжи. В проведенном эксперименте уреазной активностью обладали дрожжи всех выделенных штаммов, кроме штамма 8 и 10. Следовательно, можно предположить, что штаммы 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 11, 12, 13, 14, 15, 16 относятся к базидиомицетным дрожжам, а штаммы 8 и 10 – к аскомицетным дрожжам. Амилолитическую активность проверяют с помощью агаризованной среды, содержащей водорастворимый крахмал, проводя тест на амилазу с йодом (реактив Люголя). В положительном случае не происходит окрашивания среды в синий цвет, среда остается бесцветной, либо четко видны зоны гидролиза по краю колонии. Высокая амилолитическая активность отмечена у штаммов 1, 2, 3, 6, 9, 12, 13, 14, 15 (зона гидролиза с диаметром 10-20 мм). Активность отсутствовала у штаммов 8 и 16. Протеолитическую активность дрожжей исследуют с помощью молочного агара, отмечая просветление среды при гидролизе казеина молока. Высокая протеолитическая активность отмечена у штаммов дрожжей 1, 3, 4, 5, 13, 14, 15 (зона гидролиза с диаметром 10-20 мм). Штаммы 2, 6, 7, 8 не обладали протеолитической активностью.