Птицын К.Г., Баймиев А.Х. ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ, ВСТУПАЮЩИХ В СИМБИОЗ С ЧИНОЙ ЛЕСНОЙ LATHYRUS SYLVESTRISL
Cобраны клубеньки чины лесной с 4 растений в количестве около 60 штук на территории Кайпановского лесничества Республики Башкортостан. Выделены чистые культуры клубеньковых бактерий в количестве 52 штамма. Проведён RAPD анализ, показавший их высокую гетерогенность. С помощью ПДРФ анализа гена 16S рРНК показана принадлежность исследуемых штаммов к одному виду. Секвенирование показало, что последовательность гена 16S рРНК исследуемых штаммов клубеньковых бактерий чины лесной имеет высокую гомологию с последовательностью аналогичного гена Rhizobium leguminosarum. В результате исследований выявлено, что чина лесная, произрастающая на территории Кайпановского лесничества Республики Башкортостан, внутри одной популяции вступает в симбиоз только с zobium leguminosarum.
Одним из важнейших процессов, от которого зависит биологическая продуктивность почв, является фиксация микроорганизмами азота атмосферы. Проблема биологической азотфиксации является одной из основных проблем в сельскохозяйственной и биологической науках. Продуктивнее всего азот фиксируют клубеньковые бактерии в симбиозе с бобовыми растениями.
С целью исследования генетического разнообразия клубеньковых бактерий, нодулирующих растения чины лесной внутри одной популяции, проведена следующая работа. На территории Кайпановского лесничества Республики Башкортостан (квартал 90, выдел 6) на площади 3,2 га выбрана популяция чины лесной. Внутри данной площади была выбрана делянка, площадью примерно 100 кв.м. Данная делянка условно была разделена на 9 квадратов (3х3), стороной по 10м. У растений чины лесной, произрастающих на углах данных дратовква и отстающих друг от друга на 10м были собраны клубеньки, из которых в дальнейшем были выделены чистые культуры клубеньковых бактерий. Таким образом, с 4 растений собрано примерно 60 клубеньков, из которых в дальнейшем выделено 52 штаммов бактерий.
С помощью RAPD анализа определена генетическая гетерогенность выделенных штаммов. Обнаружено, что выделенные штаммы обладают высокой степенью генетической гетерогенности, что говорит об их принадлежности к разным штаммам. С целью исследования филогении исследуемых штаммов клубеньковых бактерий проведен ПДРФ анализ гена 16S рРНК c использованием мелкощепящих рестриктаз Kzo91 и HaeIII. Выявлено, что все исследуемые штаммы по 16S ПДРФ профилю оказались идентичны. Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод, что с чиной лесной вступают биозв сим клубеньковые бактерии одного вида, но разных штаммов.
В дальнейшем нами был секвенирован ген 16S рРНК выделенных культур клубеньковых бактерий для выявления их филогенетического положения и видовой принадлежности. Оказалось, что исследуемые штаммы близки по последовательности 16S рРНК к Rhizobium leguminosarum. Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод, что чина лесная, произрастающая на территории Кайпановского лесничества Республики Башкортостан, вступает в симбиоз с клубеньковыми бактериями Rhizobium leguminosarum.
Загрузка ...