BioScience Blog – Научный Биологический блог

Одним из важнейших процессов, от которого зависит биологическая продуктивность почв, является фиксация микроорганизмами азота атмосферы. Проблема биологической азотфиксации является одной из основных проблем в сельскохозяйственной и биологической науке. Продуктивнее всего азот фиксируют клубеньковые бактерии в симбиозе с бобовыми растениями.

С целью исследования гетерогенности клубеньковых бактерий, нодулирующих растения чины весенней внутри одной популяции, нами проведена следующая работа. На территории Кайпановского лесничества Республики Башкортостан (квартал 90, выдел 6) на площади 3,2 га была выбрана популяция чины весенней. Внутри данной площади была выбрана делянка, площадью примерно 100 кв.м. Данная делянка условно была разделена на 9 квадратов (3×3), стороной по 10 м. У растений чины весенней, произрастающих на углах данных квадратов и отстающих друг от друга на 10 м были собраны клубеньки, из которых в дальнейшем были выделены чистые культуры клубеньковых бактерий. Таким образом, с 16 растений было собрано примерно 120 клубеньков, из которых в дальнейшем было выделено 117 штаммов бактерий.

С помощью RAPD анализа была определена генетическая гетерогенность выделенных штаммов. Было обнаружено, что выделенные штаммы обладают высокой степенью генетической гетерогенности, что говорит об их принадлежности к разным штаммам. С целью исследования филогении исследуемых штаммов клубеньковых бактерий был проведен ПДРФ анализ гена 16S рРНК с использованием мелкощепящих рестриктаз Kzo91 и НаеШ. Было выявлено, что все исследуемые штаммы по 16S ПДРФ профилю являются идентичными. Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод, что с чиной весенней внутри одной популяции вступают в симбиоз клубеньковые бактерии одного вида, но разных штаммов.

В дальнейшем нами планируется секвенировать ген 16S рРНК выделенных культур клубеньковых бактерий для выявления их филогенетического положения и видовой принадлежности.