BioScience Blog – Научный Биологический блог

Важным направлением в разработке биотерапевтических методов лечения инфекционных, аутоиммунных и онкологических заболеваний является применение препаратов, повышающих активность эффекторов врожденного и адаптивного иммунитета [1, 2, 3]. Иммуномодуляторы различной природы влияют на активацию лимфоцитов, макрофагов, натуральных киллеров и других торовфак естественной резистентности организма [1,4].

Цель исследования — изучение действия иммуномодулирующего препарата — нуклеината натрия (NN) на структуру и клеточный состав лимфоидных (тимус и селезёнка) и паренхиматозных (печень, лёгкие) органов в эксперименте.

Для исследования были взяты 2 группы мышей линии Balb/c весом 22—26 г. 1-я группа — интактные животные (контрольная), 2-я — мыши, которым однократно внутрибрюшинно вводили нуклеинат натрия (натриевую соль низкомолекулярной РНК, выделенной из пекарских дрожжей) в дозе 100 мкг/кг веса. Исследовали функциональную активность (цитотоксическую и пролиферативную способность) мононуклеарных лейкоцитов (МЛ), выделенных из селезёнки экспериментальных животных, при введении в культуры от 1 до 100 мкг/мл NN. Парафиновые срезы органов, которые забирали, через 24 и 120 часов после инъекции, окрашивали гематоксилином — эозином, по Ван Гизону, метиловым зеленым — пиронином по Браше и Шифф — йодной кислотой по Мак-Манусу.

Результаты исследования показали, что воздействие нуклеината натрия вызывает морфологические изменения как лимфоидных, так и паренхиматозных органов, а также активизацию функциональных способностей спленоцитов. Через 24 часа в селезенке наблюдается активная лимфоидная пролиферация, что приводит к формированию фолликулов неправильной формы и слиянию их в крупные конгломераты. В результате этого белая пульпа занимает большую часть срезов органа. Фолликулы не разграничены на зоны, во всех участках лимфоидной ткани содержатся многочисленные бластные формы и макрофаги. Обращает на себя внимание значительное количество мегакариоцитов, которые располагаются группами как в красной, так и в белой пульпе. Красная пульпа гиперемирована. В тимусе хорошо развито корковое вещество, мозговое вещество имеет вид мелких   вкраплений.   В   субкапсулярной   зоне   лимфоидные   клетки

располагаются более рыхло, среди них выявляются многочисленные бластные формы. Тельца Гассаля единичны. Выявляются гепатоциты с крупными и гиперхромными ядрами. Вокруг портальных сосудов и внутри долек обнаруживаются лимфоидные скопления. Купферовские клетки активизированы, синусоидные капилляры расширены. Кровеносные сосуды легких наполнены кровью, в межальвеолярной ткани выявляются макрофаги, содержащие в цитоплазме ШИК-положительные гранулы. Морфологические изменения органов, взятых после 120 часов, уже не столь значительны, как через 24 часа после введения мышам нуклеината натрия. В селезенке лимфатические фолликулы имеют крупные размеры, но правильную овальную форму и не сливаются друг с другом. Фолликулы не разграничены на зоны, содержат меньшее количество бластных форм. В красной пульпе наблюдается большое количество цитовлимфо, среди которых выделяются бластные клетки. Многочисленные мегакариоциты располагаются, в основном, в красной пульпе. В большей степени изменения сохранены в тимусе: в дольках его практически отсутствует мозговое вещество, плотность расположения лимфоцитов почти одинакова на всей площади дольки, за исключением разрыхленной субкапсулярной зоны, в которой видны многочисленные бластные формы. Тельца Гассаля не определяются. Паренхима печени включает много гепатоцитов с гипертрофированными ядрами. Купферовские клетки не столь активны, как в предыдущий срок исследования, синусоидные капилляры не расширены. В лимфоидных инфильтратах вокруг портальных сосудов обнаруживаются клетки плазмоцитарного ряда. В межальвеолярной ткани лёгких наблюдаются макрофаги, вокруг бронхиол встречаются небольшие лимфоидные скопления. Проведённые исследования показали, что лимфоциты лученные,по в результате воздействия NN, характеризуются значительно большей функциональной активностью по сравнению с исходными МЛ. Цитотоксическая способность клеток по отношению к опухолевой линии К562 повышается с 21,5% в контроле до 53,3-77,4% через 96-120 часов после введения NN. Пролиферативная активность увеличивается от 8,3% в контроле до 60,4 %— через 24часа, уменьшаясь затем до 34,5% — через 120 часов с начала эксперимента.

Таким разомоб, под влиянием нуклеината натрия повышается функциональная активность мононуклеарных лейкоцитов, в лимфоидных и паренхиматозных органах наблюдаются морфологические изменения, которые характеризуются пролиферацией клеток и лимфоидного, и тромбоцитарного рядов, активизацией макрофагальной системы и клеток паренхимы, гиперемией сосудистого русла. Наиболее выражены данные процессы через сутки после введения препарата. Следовательно, нуклеинат натрия обладает активными иммуномодулирующими свойствами, которые могут быть использованы при разработке методов иммунотерапии заболеваний различного генеза.

Литература

1. Кузник Б.И. и др. Влияние иммуномодулирующей терапии на течение острых и инфекционных заболеваний легких у взрослых и детей и др. // Мед. иммунол. – 2003. – Т. 5, № 3-4. – С. 301.

2. Chang Y.C. et al. Current and potential uses of imiquimod // South. Med. J. – 2005. – V. 98. – P. 914-20.

3. Speiser D.E. et al. Rapid and strong human CD8+ T cell responses to vaccination with peptide, IFA, and CpG oligodeoxynudeotide 7909 // J. Clin. Invest. – 2005. – V. 115. – P. 739-746.

4. Маркова Т.П., Чувиров Д.Г. Бактериальные иммуномодуляторы // Русский медицинский журнал. – 2001. – Т. 9, № 16-17. – С. 703-705.