BioScience Blog – Научный Биологический блог

Хепсин относится к семейству трансмембранных сериновых протеаз второго типа. Открытие хепсина произошло более двадцати лет назад, однако его физиологические функции остаются не до конца ясными. В последние годы накоплен большой объем данных о возможном участии хепсина в развитии и прогрессировании некоторых опухолевых заболеваний, одним из которых является рак предстательной железы. Исследование профилей экспрессии генов в здоровых и опухолевых клетках предстательной железы выявляет в последних стабильную гиперэкспрессию хепсина, уровень которой коррелирует с прогрессированием заболевания. Слабая при гиперплазии и на ранних стадиях опухолевого процесса, экспрессия хепсина значительно увеличивается на терминальных стадиях заболевания.

В настоящее время во врачебной практике для диагностики рака предстательной железы наиболее широко используется метод, основанный на определении простат-специфического антигена в крови человека. Недостатком данного теста является его низкая достоверность. В связи с этим актуальным является вопрос выбора иных маркеров заболеваний предстательной железы, обладающих большей диагностической ценностью.

Целью нашей работы является создание неинвазивного метода диагностики рака предстательной железы, основанного на определении активности хепсина с применением хромогенного субстрата. Получен рекомбинантный хепсин, используемый в тест-системе для стандартизации, оптимизированы условия его экспрессии в бактериальной системе. Разработана методика очистки рекомбинантного хепсина с использованием методов аффинной металло-хелатной и ионообменной хроматографии. Охарактеризовано взаимодействие рекомбинантного хепсина с различными субстратами, а также с селективным ингибитором. Проведено исследование активности хепсина более чем в 100 образцах, взятых у пациентов с патологиями предстательной железы различной степени тяжести. Установлены следующие интервалы активности хепсина для основных заболеваний предстательной железы, р<0,05: не более 0,187 нмоль/л*мин у здоровых лиц, 0,187 – 0,395 нмоль/л*мин в группе больных хроническим простатитом и доброкачественной гиперплазией предстательной железы, 0,395 – 1,559 нмоль/л*мин в группе больных простатической интраэпителиальной неоплазией и более 1,559 нмоль/л*мин в группе больных раком предстательной железы.