BioScience Blog – Научный Биологический блог

Курилова Л.С., Крутецкая З.И., Лебедев О.Е. и др.

Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург (Россия).

E-mail: zik@bio.pu.ru

Для подтверждения гипотезы о том, что примембранные актиновые филаменты могут участвовать в регуляции входа Са2+ в клетки, было исследовано влияние каликулина А, вызывающего конденсацию актиновых филаментов у плазмалеммы, на Са2+-сигналы, индуцированные пуринергическим агонистом АТФ или ингибитором эндоплазматических Са2+-АТФаз тапсигаргином, в перитонеальных макрофагах крысы.

С использованием флуоресцентного Са2+-зонда Fura-2AM показано, что каликулин А (100 и 200 нМ) не влияет на фазу мобилизации Са2+ из депо, вызываемую АТФ или тапсигаргином, но вызывает дозо-зависимое подавление депо-зависимого входа Са2+ в макрофаги. Кроме того, эффект каликулина А зависит от времени его воздействия на клетки. Наибольшее подавление (на 70-80%) депо-зависимого входа Са2+ наблюдалось при длительной (10 мин) преинкубации макрофагов с 200 нМ каликулина А. Полученные данные свидетельствуют об участии актиновых филаментов в активации депо-зависимого входа Са2+ в макрофагах.

Добавление каликулина А на фоне развившегося входа Са2+, индуцированного тапсигаргином или АТФ, приводит к постепенному снижению внутриклеточной концентрации Са2+, что свидетельствует о том, что каликулин А подавляет также и уже развившийся вход Са2+ в макрофаги. Это свидетельствует об участии актинового цитоскелета не только в активации, но и в поддержании депо-зависимого входа Са2+ в макрофаги.

Таким образом, эксперименты с использованием каликулина А подтверждают модель депо-зависимого входа Са2+ «связывание по типу секреции» для макрофагов, предполагающую обратимую транслокацию Са2+-депо к плазмалемме и происходящую с участием актиновых филаментов. При этом, образование плотного слоя кортикального актина, происходящее под действием каликулина А, может препятствовать связыванию депо с мембраной.