BioScience Blog – Научный Биологический блог

С.И. Гривенников, И.Е. Ковалева

В настоящее время предпринимаются многочисленные попытки гетероло-гической экспрессии белков в различных организмах. При экспрессии цитохрома p450scc из коры надпочечников быка в клетках E. coli белок правильно встраивается в мембрану , в то время как в дрожжевых митохондриях данный белок правильно процессируется, но затем агрегирует и лишь небольшая его часть сохраняет способность встраиваться во внутреннюю мембрану [1]. Сделано предположение о наличии некоторой видовой специфичности шаперонов, участвующих в правильном сворачивании и топогенезе цитохрома p450scc. Предпринята попытка преодолеть агрегацию и восстановить правильный топогенез этого белка, осуществляя гиперэкспрессию некоторых дрожжевых митохондриальных шаперонов или за счет увеличения соотношения шапероны/мишень при встраивании единичной копии гена цитохрома p450scc в ядерный геном дрожжей. Опыты по экстракции Тритоном Х-100 в различных концентрациях, а также анализ содержания белка в субмитохондриальных частицах, матриксе и во фракции матриксных белковых агрегатов позволили установить, что цитохром p450scc действительно накапливается в форме агрегатов именно в матриксе, а не в мембраносвязанной форме. Гиперэкспрессия шаперона HSP78, частично способного выполнять функции митохондриального шаперона ssc1p (hsp70), но не участвующего в представлении неправильно свернутых белков к протеолизу, не привела к изменению топогенеза экспрессируемого в дрожжевой системе гетерологического цитохрома p450scc.

1. Савельев А.С., Новикова Л.А., Друца В.Л., Исаева Л.В., Черноголов А.А., Усанов С.А., Лузиков В.Н. Синтез и некоторые аспекты топогенеза цитохрома p450scc быка в дрожжах // Биохимия, 1997, т. 62, вып. 7, С. 908-916