BioScience Blog – Научный Биологический блог

Джаврушян А.Г., Хачатрян Н.С.

Ереванский государственный университет, Ереван (Армения).

E-mail: hayarpie@mail.ru

Синтез NO осуществляется синтазой оксида азота (КФ 1.14.13.39, NOS) из L-аргинина. NO образуется в организме человека и высших животных практически во всех органах и тканях, проявляет как цитопротекторные, так и цитотоксические свойства. Существуют 3 изофермента NOS: 1-нейрональный, 2-индуцибельный, 3- эпителиальный, которые отличаются каталитическими свойствами регуляцией, свойством подвергаться индукции, внутриклеточной локализацией, органно-тканевой специфичностью. Изофермент NOS-2 в отличие от NOS-1 и NOS-3, которые конститутивны, индуцируется цитокинами (интерлейкины, интерфероны и др.), подвергая клетки активированию. С этой точки зрения хорошо изучень индуцибельный изофермент (NOS-2) макрофагов.В качестве объекта исследования использовали белых лабораторных крыс, содержавшихся на стандартном рационе вивария. Целью представленной работы было исследование бнутриклеточной локализации NOS печени, мозга и почек крыс. Гомогенаты были готовлены на 0.1М трис-HCl буфере содержащим 2mM дитиотритол, 1 mM ЭДТА, 3 mM MgCl2, pH 7,4. Обнаружен ферментативная активность в гомогенатых исследованных органов крыс (в печени 0,066 мкмоль, в мозге 0,09 мкмоль, в почках 0,041 мкмоль NO 1г свежей ткани). Для определения внутриклеточной локализации NOS, гомогенаты центрифугировали при 1500g (6000 оборот в минуту) в течении 10минут. Активность фермента определялось в надосадке и в осадке спектрофотометрическим методом.

Согласно полученным данным NOS-ная активность обнаружена как в растворимой фракции, так и во фракции субъклеточных структур печени, мозга и почек крыс (соответственно в соотношении 1:1,5), сумма активности которых соответствует начальной активности фермента гомогената.