BioScience Blog – Научный Биологический блог

Шишова А.А., Простова М.А.,Бахмутов Д.В. и др.

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П Чумакова РАМН, Москва (Россия), Radboud University Nijmegen (Netherlands),

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, Москва (Россия).

Читать далее…

М.О. Потапенко

Аминоазосоединения широко используются в качестве красителей во многих отраслях промышленности: косметической, пищевой, кожевенной, бумажной, текстильной и т.д. Однако существуют данные, что некоторые из них канцерогенны для животных и проявляют положительный отклик в тестах на мутагенность[1,5,6].

Читать далее…

Шеина Ю.И., Еремеев А.В.

Красноярский центр репродуктивной медицины, Красноярск (Россия), Красноярский государственный медицинский университет, Красноярск (Россия), Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва (Россия).

Читать далее…

Шапырина Е.В., Солонин А.С.

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина, Пущино (Россия).

E-mail: epoxidka@rambler.ru

К цереусной группе микроорганизмов относят B. anthracis- широко известный возбудитель сибирской язвы, B. thuringiensis, применяемый как биологический инсектицид и B. cereus, часто рассматриваемый как почвенный оппортунистический патоген. Редкие, большей частью не фатальные заболевания, ассоциированные с B. cereus, это: эндофтальмиты, встречающиеся при травмах глаз и пищевые отравления. Однако, некоторые изоляты B. cereusспособны вызывать более серьёзные заболевания, в ряде случаях с летальным исходом и по клиническим симптомам сходные с сибирской язвой.

Читать далее…

В. А. Полевод

Исследования по данной группе для территории Кемеровской области не проводились. Район исследований включает Кузнецкую котловину, Салаирский кряж, Кузнецкий Алатау и Горную Шорию (от северных степей до горных тундр). За период 1995-1999 гг. выявлено 187 видов пядениц, относящихся к 93 родам 5 подсемейств.

Читать далее…

ШапыринаЕ.В., Шадрин А.М., Солонин А.С.

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина, Пущино (Россия).

E-mail: epoxidka@rambler.ru

Bacilluscereus - широко распространенная, спорообразующая, условно-патогенная для человека грам-положительная бактерия. Некоторые штаммы B. cereus могут вызывать пищевые отравления, посттравматические инфекции, а также другие заболевания. Читать далее…

С.Н. ПЛЕСКОВА

АПАК (альтернативный путь активации комплемента) начинает функционировать до формирования специфических антител и служит одним из базисных механизмов опережающего иммунного ответа. Изучали микробозависимые нарушения АПАК, служащие для оценки патологических состояний организма. Антикомплементарной активностью обладали все изученные штаммы. Установлено, что нарушения в системе АПАК, по-видимому, не исчерпываются действием пептидогликана и тейхоевых кислот.

Читать далее…

Шалгуев В.И.

Петербургский институт ядерной физики, Гатчина (Россия). E-mail: shalguev@omrb.pnpi.spb.ru

Одним из важных этапов изучения механизма гомологической рекомбинации (ГР) у эукариот является получение в препаративных количествах высокоочищенных белков — ключевых участников ГР. Хорошо известно, что белок Rad51 и его паралоги — основные участники ГР. Цель данного исследования — разработка метода получения высокоочищенных Rad51-подобных белков H. sapiensв препаративных количествах для биохимического анализа. Существует проблема экспрессии некоторых эукариотических генов в бактериях: экспрессированные рекомбинантные белки, например, отдельные белки H. sapiens, часто переходят в нерастворимое состояние, образуя тельца включения. Один из способов предотвращения образования телец включения — это добавление к аминоконцевым последовательностям рекомбинантных белков домена белка SUMO (small ubiquitin-like modifier). Домен SUMO обеспечивает шаперонный эффект и способствует увеличению растворимости полученных химерных белков. Клонирование кодирующих последовательностей человеческих белков Rad51B, Rad51C, Rad54 было проведено таким образом, что каждый ген на отдельной плазмиде оказался слитым (в одной рамке считывания) с лидерной последовательностью, кодирующей домен SUMO, и участком узнавания специфической протеазы SUMO. Для клонирования использовали плазмидные векторы pET21d (Novagen) и pASK-IBA2 (IBA), кодирующие в лидерной последовательности аффинные эпитопы двух видов: полигистидиновый (6xHis) либо стрептавидиновый (TrpSerHisProGlnPheGluLys) тракты. В результате экспрессии полученных конструкций продуцировались химерные белки Rad51B, Rad51C либо Rad54, каждый из которых содержал в лидерной последовательности: в одном случае эпитоп His6-SUMO, в другом — Strep-SUMO. Кодоновую оптимизацию обеспечили синтезом invivoдополнительных тРНК (tRNAArg3 и tRNAArg4), локализованных на отдельной плазмиде. Анализируя экспрессию плазмид в клетках BL21(DE3)ДrecA, оценили молекулярные массы рекомбинантных белков человека Rad51B (≈55 кДа), Rad51C (≈60 кДа), Rad54 (≈100 кДа). Аффинная хроматография белка Rad51C на Ni2+-NTA агарозе и последующий протеолиз белка протеазой SUMO подтвердил наличие отщепляемого N-концевого эпитопа His6-SUMO (≈15 кДа), слитого с белком Rad51C (≈45 кДа). Таким образом, была показана принципиальная возможность применения предложенных векторов для экспрессии и выделения нативных белков Rad51B, Rad51C, Rad54 в E.coli.