ДЕЙСТВИЕ ЭМИ КВЧ НИЗКОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ И СТИМУЛЯТОРА РОСТА С-2 НА АКТИВНОСТЬ ПЕРОКСИДАЗЫ ПРОРОСТКОВ ПШЕНИЦЫ
Неркарарян А.В., Хачатрян А.В., Карапетян А.А. и др.
Ереванский государственный университет, Ереван (Армения), 2Институт биохимии им. Г.Х. Буниатяна НАН РА, Ереван (Армения).
E-mail: artashes.k@rambler.ru
ВЛИЯНИЕ ВИТАМИНА А НА АКТИВНОСТЬ ГЛУТАТИОН-S-ТРАНСФЕРАЗЫ И ТРАНСПОРТ ГЛУТАТИОН-S-КОНЪЮГАТОВ В ЭРИТРОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА
Канаш Ю.С.
ГНУ «Институт биофизики и клеточной инженерии НАН Беларуси», Минск (Беларусь).
E-mail: jurakanash@rambler.ru
Образование коньюгатов глутатиона с ксенобиотиками и экспорт их из клетки является одним из универсальных путей детоксикации клеток, в т.ч. и опухолевых, что препятствует тем самым адекватной химиотерапии при лечении онкологических заболеваний. Поиск эффективных и нетоксичных ингибиторов и регуляторов функциональной активности белков, ответственных за формирование множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) клеток, является актуальным для современной биологии и медицины. Цель данной работы – изучить влияние витамина А на активность глутатион-S-трансферазы (GST) и характеристики транспорта 2,4-динитрофенил-S-глутатион конъюгатов (DNP-SG) из эритроцитов человека. В работе изучено влияние витамина А в субгемолитических концентрациях. Полученные результаты свидетельствуют об ингибировании активности эритроцитарной GST витамином А и наличии IC50 для эритроцитов, составляющей десятки микромоль, что соответствует литературным данным для плацентарной GST. Концентрация ретинола, при которой скорость выхода конъюгатов глутатиона из эритроцитов снижалась в 2 раза, составляла порядка сотни микромоль, а максимальный значимый эффект наблюдали при действии 0,5 мМ витамина А. Так как за экспорт DNP-SG из эритроцитов отвечают в основном MRP-белки, то полученные данные свидетельствуют о влиянии витамина А на функциональную активность этих белков. Коэффициент ранговой корреляции собственных данных с данными по транспорту DNP-SG конъюгатов, вычисленный по соответствующим семи донорам, свидетельствует о наличии нелинейной связи между этими 2-мя процессами. Таким образом, витамин А оказывает выраженное ингибирующее действие на активность GST и снижает скорость выхода DNP-SG конъюгатов в эритроцитах, что указывает на возможность использования его как регулятора функциональной активности белков, ассоциированных с устойчивостью клеток к действию ксенобиотиков.
МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ УФ-ОБЛУЧЕННЫХ ЛИМФОЦИТОВ
Земченкова О.В., Башарина О.В., Артюхов В.Г.
ГОУ ВПО Воронежский государственный университет, Воронеж (Россия). E-mail: pli807@mail.ru
Установлено, что аутотрансфузия УФ-облученной крови (АУФОК) сопровождается улучшением иммунологического статуса организма, которое может быть следствием структурно-функциональных изменений иммунокомпетентных клеток крови, индуцируемых при действии на нее УФ-света в нелетальных дозах (Самойлова, 1986).
РЕАКЦИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ НА ВОЗДЕЙСТВИЕ ИМПУЛЬСНО-ПЕРИОДИЧЕСКИХ МИКРОВОЛНОВОГО И РЕНТГЕНОВСКОГО ИЗЛУЧЕНИЙ
Жаркова Л.П., Князева И.Р., Большаков М.А., Ростов В.В.
Томский государственный университет, Томск (Россия),
Институт сильноточной электроники СО РАН, Томск (Россия).
E-mail: Zharkova_lubov@mail.ru
В настоящее время актуальным является вопрос о механизмах биологического действия импульсно-периодических микроволнового (ИПМИ) и рентгеновского (ИПРИ) излучений с импульсами наносекундной длительности. Действие таких излучений исследовано не достаточно, однако есть данные о том, что они оказывают влияние на биологические объекты и процессы протекающие в них. В частности при воздействии этими излучениями на область печени мышей invivo, изменяются биохимические показатели крови и происходит окислительная модификация ее липидов и белков. Такие изменения крови invivo, могут быть следствием изменения функционирования самой печени, а так же результатом прямого влияния на кровь или другие физиологические системы, связанные с кровью. Поэтому представляется интересным изучить влияние импульсно-периодических факторов на кровь и ее отдельные компоненты in vitro.
ТЕПЛОВАЯ ДЕНАТУРАЦИЯ АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ СИНАПТИЧЕСКИХ МЕМБРАН ИЗ МОЗГА КРЫС И СУСЛИКОВ
Джафарова А.М., Мейланов И.С., Кличханов Н.К., Матхур Т.Х.
Дагестанский государственный университет, Махачкала (Россия). Email: meylanovis@mail.ru
Ацетилхолинэстераза (АХЭ) – фермент, регулирующий активность холинергической системы мозга. В мозге крысы АХЭ представлена тетрамером идентичных субъединиц, заякоренным на внешней поверхности постсинаптической мембраны. При изменении физиологического состояния животного в структуре АХЭ могут происходить изменения, которые могут повлиять на её термостабильность. В связи с этим нами исследована кинетика тепловой (48°С) денатурации АХЭ синаптических мембран мозга крыс. Кинетика денатурации АХЭ хорошо согласуется с двух-экспоненциальной моделью. Быстрая стадия имеет константу скорости денатурации л1= 0.32 мин-1 , а медленная стадия л2 = 0.038 мин-1. Поскольку в мозге млекопитающих экспрессируется, главным образом, одна форма фермента, полученные данные указывают на двухстадийный механизм денатурации с одной промежуточной формой. Охлаждение животных до ректальной температуры 20°С не привело к статистически достоверным изменениям констант скорости денатурации АХЭ, но уменьшило активность фермента. Измерена также термостабильность АХЭ синаптических мембран мозга суслика при бодрствовании и состоянии глубокой спячки. При спячке активность фермента существенно возрастает, при этом константы скорости денатурации обеих стадий уменьшаются. Из литературных данных известно, что солюбилизированные мономерные и димерные формы АХЭ из различных источников имеют одноэкспоненциальную кинетику тепловой денатурации, а добавление липосом к раствору фермента резко дестабилизирует структуру. Мы предполагаем, что взаимодействие тетрамера АХЭ с синаптической мембраной in vivo также лабилизирует структуру АХЭ. Но при этом стабилизируется близкое к нативному промежуточное состояние (обладающее меньшей каталитической активностью), в результате чего кинетика денатурации становится двухэкспоненциальной. Обсуждаются возможные связи между изменением активности АХЭ и её термостабильностью.
ИССЛЕДОВАНИЕ НАЧАЛЬНЫХ ЭТАПОВ ЭМБРИОГЕНЕЗА ЗАРОДЫШЕЙ МЫШИ В «НУЛЕВОМ» МАГНИТНОМ ПОЛЕ
Гольтяев М.В., Осипенко М.А., Межевикина Л.М., Яшин В.А.
Институт биофизики клетки РАН, Пущино (Россия). E-mail: goltayev@mail.ru
Экранирование магнитного поля (МП) Земли оказывает значительное влияние на биологические объекты, однако эффекты такого воздействия в настоящее время остаются малоизученными. Целью настоящей работы было исследование влияния «нулевого» МП (250-кратное экранирование магнитного поля Земли) на ранние зародыши мыши в системе invitroи invivo.
МОДИФИКАЦИЯ КАЛЬЦИЕВОГО ГОМЕОСТАЗА В КЛЕТКАХ НЕр-2 ПРИ ДЕЙСТВИИ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ
Голубева Е.Н.
БГУ, Минск (Беларусь).
E-mail: golubeva.ln.87@gmail.com
К числу актуальных направлений современной биофизики клетки относятся поиск и изучение новых путей регуляции функциональной активности клеток. Одним из ранних ответов сигнальных систем на изменение концентрации окислителей в клетках является повышение внутриклеточной концентрации несвязанного кальция. Выход Са2+ из митохондрий при действии окислителей происходит при патофизиологических условиях и служит важным звеном в механизмах гибели клеток. В свою очередь многочисленные исследования демонстрируют также возможность индуцирования гибели опухолевых клеток аскорбиновой кислотой in vitro, не оказывая при этом негативного действия на нормальные клетки. Предполагается, что ключевая роль в цитотоксичности аскорбиновой кислоты принадлежит пероксиду водорода. Однако механизм избирательного цитотоксического действия аскорбиновой кислоты в отношении опухолевых клеток, участие в данных процессах пероксида водорода, а также мишени действия аскорбиновой кислоты в клетках остаются не изученными.
МЕМБРАННЫЕ ЭФФЕКТЫ ИОНОВ ЦИНКА
Гармаза Ю.М.
ГНУ «Институт биофизики и клеточной инженерии НАН Беларуси», Минск (Беларусь).
E-mail: garmaza@yandex.ru
Ионы цинка принимают участие во многих физиологических процессах, являются кофактором ряда ферментов, но в высоких концентрациях они могут действовать как токсиканты и приводить к изменению свойств клеточных мембран. Однако вопрос о мембранных эффектах ионов цинка окончательно не решен. Цель работы – изучить влияние субгемолитических концентраций ионов цинка на состояние белков и липидов в мембранах эритроцитов человека. О модификации структурно-функционального состояния мембранных белков судили по параметрам УФ-флуоресценции и флуоресценции N-(1-пирен)-малеимида (ПМ), связанного с SH-группами мембранных белков; а об изменении физического состояния мембранных липидов – по поляризации флуоресценции липофильных зондов. С помощью флуоресцентных зондов 1-(4-триметиламмоний-фенил)-6-фенил-1,3,5-гексатриена p-толуен-сульфоната и лаурдана показано, что после воздействия сульфата цинка в субгемолитических концентрациях на изолированные мембраны эритроцитов происходит увеличение микровязкости липидного бислоя. Обнаружено достоверное увеличение интенсивности собственной флуоресценции белков мембран эритроцитов, подвергшихся воздействию ионов цинка. После инкубации изолированных эритроцитарных мембран с микромолярными концентрациями сульфата цинка происходило достоверное повышение интенсивности флуоресценции ПМ, встроенного в мембраны эритроцитов, что свидетельствует об увеличении уровня SH-групп. Полученные результаты позволяют сделать вывод, что ионы цинка, взаимодействуя с плазматической мембраной эритроцитов человека, могут изменять как микровязкость липидного бислоя, так и структурное состояние мембранных белков.